Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-594培养 返回列表页

细胞名称  Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-594培养
形态特性   上皮样
生长特性  贴壁生长
特征特性   该细胞是采用慢病毒感染的方式使NCI-H1975细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件   RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418
传代方法  1:3~1:6传代；每周换液2~3次。　
传代情况  C3
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测  培养法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：17,17；D13S317：10,13；D16S539：9,12；D18S51：13,13；D19S433：15,15.2；D21S11：28,28；D2S1338：17,17；D3S1358：14,15；D5S818：11,12；D6S1043：12,12；D7S820：8,8；D8S1179：13,13；FGA：21,24；Penta E：12,12；TH01：7,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶

染色体

使用权限 A类
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-594培养质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-594培养细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量*，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-594培养培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
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CD276 Others Rat 大鼠 B7-H3 / CD276 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0108HIC(人小肠癌细胞)5×106cells/瓶×2

人表皮黑色素细胞-深色素裂解物HELM-d L

Anglne细胞，人卵巢癌细胞系 大黄鱼EPC细胞,EPC细胞 上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

Calu-6(人肺退行性癌细胞) 5×106cells/瓶×2

HPrSMC Pellet 人类前列腺平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人星形胶质细胞cDNAHA cDNA
HUVEC, 人脐静脉内皮细胞 Human

T-106AIV型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL

人心脏成纤维细胞( HCF) ( 5×105 )

小鼠胚胎成纤维细胞;MEF 小鼠肺大动脉平滑肌细胞*培养基 100mL

大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1

VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2

人脊髓星形胶质细胞(HA-sp)(1×106)

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌细胞株

人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7 大鼠膀胱上皮细胞*培养基 100mL

LM-8 小鼠骨肉瘤

FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照)
D/ENeutralizingAgar

FWA淡水鱼类琼脂培养基 250g 用于淡水鱼类肠道内细菌检测

改良Skirrow氏琼脂基础 Skirrow Agar Base,Modified 250 用于空肠弯曲菌的分离培养(SN 、GB标准)

m-TGE肉汤250g/瓶用于滤膜法测定奶制品中的菌落总数incubationmediam-TGE肉汤250g/瓶用于滤膜法测定奶制品中的菌落总数

Eosin-MethyleneBlueAgar
含0.2%可溶性淀粉的BCP脱脂奶粉平板计数培养基250g用于食品中嗜热菌芽孢计数(SN标准)

25L incubation media 25L

克鲁斯假丝酵母 模式菌株、生产D-乳酸 支/瓶

MEMmaintenanceoffluid

梭菌* 250g 用于梭菌的增菌培养和计数
Cas9稳定表达的人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H1975-Cas9-594培养一级目录：显色培养基二级目录：显色培养基

Casein Hydrolysate(Acid)/酪蛋白水解物(酸解) 现货 Oxoid 500g incubation media Casein Hydrolysate(Acid)/酪蛋白水解物(酸解) 现货 Oxoid 500g

绿针假单胞菌 食用 支/瓶

Bufferpeptonewater(BPW)

AntibioticAgarNO.7