Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞；MKN-45-Cas9-526品牌質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，進口來源，保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞；MKN-45-Cas9-526品牌
形態(tài)特性   圓形
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  建議初始濃度2.0×105 cells/ml，1:3傳代；4~5天１次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：26,26；D13S317：8,11；D16S539：10,10；D18S51：16,16；D19S433：14,16.2；D21S11：31,31；D2S1338：18,18；D3S1358：15,16；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：10,11；D8S1179：13,17；FGA：19,24；Penta E：10,10；TH01：7,7；TPOX：8,8；vWA：19,19；
同工酶

染色體

使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞；MKN-45-Cas9-526品牌細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
IL13 Others Human 人 IL13 / ALRH CHO細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0018A9(小鼠皮下結締組織細胞)5×106cells/瓶×2

卵巢上皮細胞生長添加物OEpiCGS

瘤牛皮膚細胞;BIN-S1 白血病單核細胞，J-1111細胞 5637(膀胱癌細胞)

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9801

TNFSF11 Others Human 人 TNFSF11 / RANKL / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照)
F9 小鼠畸胎瘤細胞

CL-0349Hela 299(人細胞)5×106cells/瓶×2

7. 肺部細胞系統(tǒng)

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;C918 大鼠前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C

SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人細胞裂解液 (陽性對照)
大額牛腎細胞;BFR-K1

人腎系膜細胞 (HRMC)(1×106 )

CL-0179P19(小鼠畸胎瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人結直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T] 大鼠雪旺氏細胞*培養(yǎng)基 100mL

PC-12(未分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)

DPP10 Others Human 人 DPP10 / DPRP3 人細胞裂解液 (陽性對照)
GramNegativeEnrichmentBroth

包姜氏培養(yǎng)基(不含瓊脂) 250g 用于百日咳菌分離培養(yǎng)

平板計數瓊脂(PCA) Plate Count Agar 250 標準平板計數瓊脂,含糖,用于細菌總數的測定(SN標準)

incubationmedia

7.5%NaClBroth
改良CCD瓊脂基礎27382250g用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO)，每基礎培養(yǎng)基需添加劑

1401-prf MenCM-prf 腦膜細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 1401-prf MenCM-prf 腦膜細胞培養(yǎng)基 500 ml

PlateCountAgar

EnterococcusfaecalisAgar

dragon牙膏稀釋緩沖液 250g 用于牙膏稀釋的稀釋液
Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞；MKN-45-Cas9-526品牌茚三酮溶液5ml*2用于空腸彎曲菌的檢測。

尿道定位顯色培養(yǎng)基 Urine Orientation Chromogenic Medium 用于分離和鑒別常見尿道致病菌

Fraser 添加劑 Fraser Supplement 5ml*2支 添加到HB4193中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)

*瓊脂基礎250g/瓶用于霍亂弧菌選擇性分離，每培養(yǎng)基中添加0543incubationmedia*瓊脂基礎250g/瓶用于霍亂弧菌選擇性分離，每培養(yǎng)基中添加0543

DoubleLactosePeptoneBroth
Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞；MKN-45-Cas9-526品牌培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于我們的技術條件，中心不保證其準確性。
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