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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌

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更新時(shí)間:2017-09-07 10:03:42瀏覽次數(shù):129次

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Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌ASL Others Human Arginosuccinase / ASL 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA

原代平滑肌細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝:1ml

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 小鼠脂肪細(xì)胞,3T3-L1細(xì)胞 SP2/0(骨髓瘤細(xì)胞)

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B

IL1RL1 Others Human IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌
形態(tài)特性   上皮樣;多角形
生長(zhǎng)特性   貼壁生長(zhǎng)
特征特性    該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使A549細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA
培養(yǎng)條件   McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法   1:3~18傳代;每周2~3次。
傳代情況  C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法(- 
STR   AmelogeninX,Y;CSF1PO10,12;D12S39118,19D13S31711,11;D16S53911,12;D18S5114,17;D19S43329,29;D21S1129,29D2S133824,24;D3S135816,16;D5S81811,11D6S104311,13;D7S8208,11D8S117913,14;FGA23,23;Penta E7,11;TH018,9.3;TPOX8,11;vWA14,14;
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。 
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3–80以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80冰箱中,但存活率稍微降低一些。 
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCCNIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。 

產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

貨期

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌

貼壁生長(zhǎng)

35

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37溫箱培養(yǎng)。
AtT20 小鼠垂體瘤細(xì)胞

CL-0431RT4(人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 (HLEC)( 5×105 )

人細(xì)胞;Hela S3 [HeLaS3] 大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人癌細(xì)胞;MDA-MB-453

VSIG4 Others Human VSIG4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1

人小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(HM) ( 5×105 )

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474 大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MFC 小鼠胃癌細(xì)胞

IL21R Others Human IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
UreaseAgarBase

鐵細(xì)菌培養(yǎng)基 250g 用于鐵細(xì)菌的分離培養(yǎng)

乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 Lactose Bile Broth 250 用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))

incubationmedia

FB1additive(A、B)
布氏肉湯27387250g用于空腸彎曲菌培養(yǎng)及運(yùn)動(dòng)性觀察。(GB、ISO)

1111-prf SMCM-sf-prf 平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 1111-prf SMCM-sf-prf 平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

總狀毛霉 /

M-EnterococcusAgar

溶血(0.1%)赫氏瓊脂 250g 用于鼠疫桿菌的分離培養(yǎng)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人肺癌細(xì)胞;A549-Cas9-538品牌幽門(mén)螺旋桿菌固體培養(yǎng)基250g用于幽門(mén)螺桿菌的分離培養(yǎng)

Fluid Tetrathionate Medium incubation media Fluid Tetrathionate Medium

安絡(luò)小皮傘菌、鬼毛針、黑柄皮傘菌 藥用 /

TrypticaseSoy-YeastExtractBroth

沙氏葡萄糖*瓊脂 250g 用于化妝品中白色念球菌分離培養(yǎng)

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