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更新時間:2017-09-06 13:08:47瀏覽次數(shù):199次
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細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細(xì)胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0176OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞裂解物HVMFL
A-704細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞,973細(xì)胞 淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔源細(xì)胞
TNFRSF1B Others Human 人 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 Rattus
CM-H096人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HVVEC)( 5×105 )
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1 小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人癌細(xì)胞;MCF7
EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0176OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞裂解物HVMFL
A-704細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞,973細(xì)胞 淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔源細(xì)胞
TNFRSF1B Others Human 人 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Anti-PLAUR/uPAR/FITC 熒光素標(biāo)記*型纖溶酶原激活因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rat IgM (親和純化) 大鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗體 Anti-HO-1/HSP32 0.1ml
Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG 1mg
FoxP3 英文名稱: 叉頭蛋白P3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-RelB(Ser552) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rat IgM (親和純化) 大鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser10) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑 規(guī)格 0.1ml
IgG 干粉 10mg/50mg/100mg 國產(chǎn)
Wnt16 英文名稱: 信號通路Wnt16抗體 0.2ml
Delta 4 英文名稱: Notch信號通路Delta樣配體4抗體 0.1ml
Anti-phospho-Acinus(Ser1180) 磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-16品牌Somatostatin Receptor 5 英文名稱: *受體5抗體 0.1ml
phospho-MEK1 (Thr292) 英文名稱: 磷酸化原活化蛋白激酶1抗體 0.1ml
CD33抗體(人) Anti-CD33 0.1ml
Anti-VEGF/FITC 熒光素標(biāo)記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK3 Alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶-3α抗體 規(guī)格 0.1ml
E-Selectin E選擇素抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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