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更新時間:2017-09-06 10:40:51瀏覽次數(shù):159次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞名稱 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 NK-92是從一位患有急進性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細(xì)胞衍生來的一株白細(xì)胞介素-2依賴型NK細(xì)胞株。 這株細(xì)胞對很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性;鉻釋放試驗顯示它能殺死K562和Daudi細(xì)胞。 NK-92細(xì)胞(經(jīng)過照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的體外免疫清掃而不危及血細(xì)胞的功能。 NK-92細(xì)胞有以下特征: CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面標(biāo)記陽性,CD56亮;CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, C
培養(yǎng)條件 α-MEM:Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]品牌培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細(xì)胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實驗細(xì)胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。
CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
615小鼠癌瘤株;Ca759
M14 人黑色素瘤細(xì)胞
MDA-MB-468人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Lewis 小鼠肺癌細(xì)胞
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系
人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞( Hac) (1×106 )
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812 大鼠腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠腎足細(xì)胞;Mouse podocyte
FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
615小鼠癌瘤株;Ca759
CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
M14 人黑色素瘤細(xì)胞
MDA-MB-468人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
phospho-FAK(pTyr577) 磷酸化粘著斑激酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
橋連整合因子蛋白抗體 Anti-BIN1 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EEF2 (Thr56) 磷酸化真核翻譯延長因子2抗體 規(guī)格 0.1ml
品名 規(guī)格 備注
ZNF342 英文名稱: 鋅指蛋白342抗體 0.2ml
phospho-DAP Kinase 1 (Ser 308) 英文名稱: 磷酸化凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 0.1ml
橋連整合因子蛋白抗體 Anti-BIN1 0.1ml
F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
抗丁酰*脂酶單克隆抗體 Anti-BCHE 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1070) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
豬血清 100ml 國產(chǎn)
ZNF786 英文名稱: 鋅指蛋白786抗體 0.2ml
DDAH2 英文名稱: 雙甲基精酸水解酶2抗體 0.2ml
抗丁酰*脂酶單克隆抗體 Anti-BCHE 0.1ml
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92]品牌ZBTB22 英文名稱: 鋅指蛋白297抗體 0.2ml
Dishevelled 2 英文名稱: 蓬亂蛋白2抗體 0.2ml
水通道蛋白-5抗體 Anti-AQP5 0.1ml
Anti-CEA/Gold 膠體金離子標(biāo)記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-ELk1(Ser383) 磷酸化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 規(guī)格 0.1ml
E2F6 轉(zhuǎn)錄因子E2F-6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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