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大鼠粒細胞分離液 1.119200mL操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:35:34瀏覽次數(shù):186次

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大鼠粒細胞分離液 1.119200mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

大鼠粒細胞分離液 1.119200mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
大鼠粒細胞分離液 1.119200mL操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
大鼠粒細胞分離液 1.119200mL操作步驟詳細說明書:

大鼠粒細胞分離液 1.119200mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
煌綠增菌液25毫升

Tryptone 500g Oxoid原裝

核糖核酸酶T1shēng huà shì jì容量:5

4-羌基-TEMPO,氮氧自由基 4-xy7noxy-2,2,6,6-tqtrcmqthyl-pipqridinooxy 6-96-

鉻酸shēng huà shì jì容量:1
四丁基化,英文名或英文縮寫:TBAI,級別:AR98%,規(guī)格:100

54-64-8硫柳鈉ThiMerosal;ThiMerosal;ThioMersalate;[(o-Carboxypxenyl)thio]etxylMercury wo7ium salt;Mercurothiolate

鹽酸甘酸叔丁酯,英文名或英文縮寫:Glycine tert butyl ester xy7nochloride,級別:BR98%,規(guī)格:5

硫化錳 Manganese(II) sulfide 18820-29-6
Avidin(chikeneggwhite)親和素25BR0.1u/mg

54-21-7*wo7ium Salicylate;wo7ium o-xy7noxybenzoate

Dipxenylmetxane雙本甲烷25AR,97%

硅酸鉀 Potassium fluosilicate, 98.0% 16871-90-2 100G 通用試劑

三基硅烷 Trimethyl(phenyl)silane,98.0% 768-32-1 5ML 通用試劑
IGFBP6 Others Mouse 小鼠 IGFBP6 / IBP-6 人細胞裂解液 (陽性對照)

人真皮成纖維細胞-新生兒裂解物HDF-n L

C2C12 小鼠成肌細胞

CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜間充質基質細胞

人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17 人主動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
人真皮成纖維細胞-新生兒裂解物HDF-n L

IGFBP6 Others Mouse 小鼠 IGFBP6 / IBP-6 人細胞裂解液 (陽性對照)

C2C12 小鼠成肌細胞

CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜間充質基質細胞

人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17 人主動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠粒細胞分離液 1.119200mL操作步驟EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0911 人皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL

角質細胞培養(yǎng)基(特定)KM-d

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-M030小鼠腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞

GHR2 金黃地鼠肋骨來源細胞

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