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L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )5mg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:09:10瀏覽次數(shù):175次

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L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )5mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

L-NMMA( NOS 抑制劑 )5mg操作步驟詳細(xì)說明書:

L-NMMA( NOS 抑制劑 )5mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
L-NMMA( NOS 抑制劑 )5mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
L-NMMA( NOS 抑制劑 )5mg操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
鎘粉100毫升

TetrathionateBrothBase 500g原裝 BD 210430

免疫血清兔抗Avidin(卵清親合素shēng huà shì jì容量:RT100

4-基環(huán)己醇;隊基環(huán)己醇 4-Mqthylcyclohqxcnol;Hqxcxy7no-p-crqsol;4-Mqthylhqxclin 289-91-3

錄代癸烷shēng huà shì jì容量:保存:-201
蘇丹Ⅳ250毫克

544-10-51-錄己烷;己基錄;錄正己烷1-Chlorohexane

2-[4-(bromometxyl)pxenyl]thiopxene 81443-46-1

1,3-二羧酸二乙酯 Diethyl 1,3-edicarboxylate,97% 105-50-0 25G 通用試劑

石油迷 50-70 Nc
AMPHOTERICINB,SOLUBILIZED可溶性兩性霉素B組織培養(yǎng)級淺黃色精細(xì)凍干粉COLDsigma

8014-95-7發(fā)煙50%(*)(腐蝕)(-3)()OleuM;Sulfuric acid

MCP瓊脂100

環(huán)戊二烯基鈉 Cyclopentadienylsodium,97% 4984-82-1 1G 通用試劑

1,1,1-三乙烷 1,1,1-Trichloroethane,ACS,99.0% 71-55-6 100ML 通用試劑
CROT Others Human CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人心臟成纖維細(xì)胞總RNAHCF tRNA

敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1

SMMC-7721細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞系,Wish細(xì)胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11

雜交瘤(B);Z51B3C10H12A12G2F7E7

HAVCR1 Others Human KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人心臟成纖維細(xì)胞總RNAHCF tRNA

CROT Others Human CROT (474 Leu/Val) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞;GH-M1

SMMC-7721細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞系,Wish細(xì)胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11

雜交瘤(B);Z51B3C10H12A12G2F7E7

HAVCR1 Others Human KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
L-NMMA( NOS 抑制劑 )5mg操作步驟EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1008 人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC

FLRT2 Others Human FLRT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-R027大鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HuH-7人肝癌細(xì)胞

HK-2 人腎近曲小管上皮細(xì)胞

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