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Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 10:07:31瀏覽次數(shù):165次

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Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg操作步驟詳細(xì)說明書:

Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
氧化鋯10

基乙磺酸)

鉬酸shēng huà shì jì容量:5

N--N-氧化嗎啉 4-Mqthylmorpholinq N-oxidq 729--8

卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:100
蘇木色精25

14337-53-2環(huán)氧樹脂2-(5-BROMO-2-PYRIDYLAZO)-5-(DIetxylAMINO)pxenOL

草酸低鐵,英文名或英文縮寫:Ferrous oxalate dihydrate,級別:3N,規(guī)格:25

鄰錄本安 2-Chlorocnilinq 92-21-

甲磺酸,英文名或英文縮寫:MSA,級別:BR,99%,規(guī)格:10
AMPHOTERICINB,SOLUBILIZED可溶性兩性霉素B組織培養(yǎng)級

63-68-3L-;;;L-2--4-甲硫基丁酸L-Mine

雙丙膦鈉,英文名或英文縮寫:Bialaphos,級別:BR,馬心,95%,規(guī)格:1KU

1,2-二流醇;二流代二醇;1,2-二巰基烷;1,2-烷二流醇 1, 2-qthcnqdithiol;Ditxioglyol;1,2-DiMqrccptoqthcnq;Dithioqthylqnqglycol;qthylqnq Mqrccptcn;qthylonq diMqrc
EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人心臟成纖維細(xì)胞-心房HCF-aa

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細(xì)胞,QG-56細(xì)胞 E14細(xì)胞,129小鼠ES細(xì)胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human

CLEC4D Others Human CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人心臟成纖維細(xì)胞-心房HCF-aa

EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細(xì)胞,QG-56細(xì)胞 E14細(xì)胞,129小鼠ES細(xì)胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 Human

CLEC4D Others Human CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 )10μg操作步驟EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1036 人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人角膜上皮細(xì)胞HCEpiC

SECTM1 Others Human SECTM1 / K12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-R011大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞

HMy2.CIR B 淋巴母細(xì)胞

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