HDAC 抑制劑1g操作步驟詳細說明書：

HDAC 抑制劑1g操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
HDAC 抑制劑1g操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
HDAC 抑制劑1g操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
扶硅酸25克RT

(Taq酶)

shēng huà shì jì容量：5克

4-基傘形同酰-beta-D-糖苷 4-Mqthylumbqllifqryl bqtc-D-gclcctosidq 6160-78-7

明膠shēng huà shì jì容量：RT10克
酸激酶/Pyruvate kinase/PK BR，300u/mg，粉末 5KU 國產(chǎn)/進口

鋁鎳合金500克

二十烷;正二十烷 qicoscnq;Icoscnq;clkcnq C20;Didqcyl 11-92-8

Dibenzothiopxene-2-boronic acid 668983-97-9

無水鈉/無水*/元明粉/Sodium sulfate anhydrous AR，99% 500克 國產(chǎn)/進口
AMMONIUMSULFATE胺超純級白色結(jié)晶粉末RTsigma

30551-89-4聚POLY(ellylemine)

4,5-dimetxyl-2-Thiopxenesulfonyl chloride 74616-28-7

乙酸甲酯 Methyl acetate,≥98% 79-20-9 100G 通用試劑

shēng huà shì jì容量：1公斤
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)(5×105)

人心肌細胞-cDNAHCM-a cDNA

大鼠骨髓瘤細胞;IR983F

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 小鼠牙細胞*培養(yǎng)基 100mL

LX-2, 人肝星形細胞株 Human

CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心肌細胞-cDNAHCM-a cDNA

小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)(5×105)

大鼠骨髓瘤細胞;IR983F

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 小鼠牙細胞*培養(yǎng)基 100mL

LX-2, 人肝星形細胞株 Human

CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照)
HDAC 抑制劑1g操作步驟細胞 人腦微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

人主動脈內(nèi)皮細胞HAEC

FAM3D Others Human 人 FAM3D 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

HSCT6 大鼠肝星狀細胞