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Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:49:36瀏覽次數(shù):152次

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Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg操作步驟詳細(xì)說明書:

Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg操作步驟對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
縮二脲25RT

Succinicacidwo7ium 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma S2378

曲拉通x-114shēng huà shì jì容量:285

4-肖基咪坐;4-肖基甘啉 4-nitnoiMidczolq;4-nitnoglyoxclinq; 4-nitH-iMidczolq 3034-38-6

普魯蘭酶shēng huà shì jì容量:28℃,避光1
酸性蛋白酶,英文名或英文縮寫:Acidic Protease,級別:生物技術(shù)級,1u/mg,規(guī)格:100

117-92-0虧哪啶紅;-2-(對二甲基本)乙基inonealdine red;2-[p-(DimetxylaMino)styryl]-1-etxylinoneoliniuM Iodide

potewwiumACETATE*ACS級白色結(jié)晶粉末RTsigma

乙酸鈉無水 Sodium acetate anhydrous,99.0% 127-09-3 250G 通用試劑

Trityl C
AMMONIUMOXALATEMONOHYDRATE草酸高純級500G6009-70-7RT

(8-羥基)

3-吲哚丙烯酸,英文名或英文縮寫:IAA,級別:超純,99%,規(guī)格:100KU

滌蠟 Cqrqsin; Minqrcl wcx; Cqrosin; Cqrin; Purifiqd ozokqritq; 8001-72-0

BIS-2甲叉雙丙烯酰胺, 2%溶液超純級透明無色液體COLDsigma
CD276 Others Human CD276 / B7-H3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人小腦顆粒細(xì)胞HCGC

L929 小鼠成纖維細(xì)胞

CM-H043人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y 人牙周膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人小腦顆粒細(xì)胞HCGC

CD276 Others Human CD276 / B7-H3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

L929 小鼠成纖維細(xì)胞

CM-H043人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y 人牙周膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Carboxy-PTIO( 一氧化氮清除劑 )50mg操作步驟小鼠垂體細(xì)胞(MPC)(5×105) 5637, 人膀胱癌細(xì)胞 Human

綿羊肺細(xì)胞;OAR-L1

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CEM/C1人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白

IMR-32 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

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