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Rhod-2,三鈉鹽1mg操作步驟

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更新時(shí)間:2017-07-20 09:37:50瀏覽次數(shù):104次

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Rhod-2,三鈉鹽1mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

Rhod-2,三鈉鹽1mg操作步驟詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

Rhod-2,三鈉鹽1mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開(kāi)即用,用戶(hù)不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開(kāi)提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿(mǎn)足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
Rhod-2,三鈉鹽1mg操作步驟對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Rhod-2,三鈉鹽1mg操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
十二烷1

Spectinomycin 500mg原裝/1g/5g原裝 INALCO1758-9311

司盤(pán)80shēng huà shì jì容量:500毫克

4-基流脲 4-PYRIDYLTHIOURqc 164670-44-4

沙氏瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:500
酸性酯酶染液shēng huà shì jì容量:RT250

9012-76-4殼聚糖Chitosan

硬脂酸鋅shēng huà shì jì容量:5

四乙二醇單甲醚 Tetraethyleneglycol monomethyl 23783-42-8 5G 通用試劑

草醋二酯;二醋二酯;草醋酯 Diqthyl oxclctq;Diqthyl qthcnqdioctq;Oxclic ccid diqthyl qstqr 1992/9/11943-83-5錄乙基2-Chloroetxyl isocyanate

25

2--4-* 2-Bromo-4-fluorophenol,98% 496-69-5 1G 通用試劑

AS-MX磷酸鹽/色酚AS-MX磷酸鹽/磷酸酚AS-MX/Naphthol AS-MX phosphate 高純,99% 500毫克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
IFNA4 Others Human IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

SW-13細(xì)胞,腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]

小鼠肝癌瘤株;H22

SPARC Others Human SPARC / Osteonectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]

IFNA4 Others Human IFNα4 / IFNa4 / Interferon alpha-4 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7

SW-13細(xì)胞,腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]

小鼠肝癌瘤株;H22

SPARC Others Human SPARC / Osteonectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Rhod-2,三鈉鹽1mg操作步驟人癌細(xì)胞;MDA-MB-231 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人肺泡上皮細(xì)胞HPAEpiC

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H099人真皮淋巴上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化)

KM9304 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞(彝族)

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