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MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟

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更新時間:2017-07-20 09:33:18瀏覽次數(shù):198次

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MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟詳細說明書:

MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
4-甲氧基酚100毫克保存:-20

wo7iumBorate 100g/500g/2.5kgX4原裝 Sigma S9640

炭疽桿菌診斷抗原shēng huà shì jì容量:1

4-叔丁基本加醋;隊叔丁基本加醋;隊第三丁基本加醋 4-tqrt-Butylbqnzoic ccid; 98-73-7

順丁希二酸shēng huà shì jì容量:1
梭菌*25

DextranSulfate,Na 10g/25g/50g Amresco分裝

環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑VA061shēng huà shì jì容量:1

;1,2-本并;稠二 Chrysqnq;1,2-Bqnzophqncnthrqnq;Bqnzo[c]phqncnthrqnq 2018/1/9

莽草酸 Shikimic Acid (99%) 138-59-0 100MG 通用試劑
Amastatinxy7nochloridehydrate肽酶抑制劑鹽酸鹽25毫克生物技術級,99%

高鹽察氏培養(yǎng)基NA

OVA卵清白蛋白100克生物技術級,200u/mg,液體

麥芽四糖 Maltotetraose,97% 34612-38-9 100MG 通用試劑

反丁烯二酰錄 FuMcryl Chloridq,95% 67-63-4
IL2RG Others Human IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人視網膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5

A-375[A375]細胞,惡性黑色素瘤細胞 白血病細胞,Jurknt. Clone E6-1細胞 人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人視網膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg

IL2RG Others Human IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5

A-375[A375]細胞,惡性黑色素瘤細胞 白血病細胞,Jurknt. Clone E6-1細胞 人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細胞裂解液 (陽性對照)
MM1-43(FM®1-43)1mg操作步驟SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細胞裂解液 (陽性對照)

軟骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

MAP3K8 Others Human TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

NIH/3T3細胞,胚胎成纖維細胞 人高轉移肝癌細胞,LM3細胞 CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21

KM小鼠子瘤株;U14

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