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DiIC1(5) 碘化物100mg操作步驟

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更新時(shí)間:2017-07-20 09:20:41瀏覽次數(shù):105次

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DiIC1(5) 碘化物100mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

DiIC1(5) 碘化物100mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開(kāi)即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開(kāi)提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
DiIC1(5) 碘化物100mg操作步驟詳細(xì)說(shuō)明書:

DiIC1(5) 碘化物100mg操作步驟對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
DiIC1(5) 碘化物100mg操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
3-錄本酸25

(沙氏葡糖瓊脂)

纖粘連蛋白shēng huà shì jì容量:RT1

5--2-典嘧啶 5-Bromo-2-iodopyrimidinq 183438-4-6

維生素A棕櫚酸酯shēng huà shì jì容量:10
肽酶shēng huà shì jì容量:保存:-205

(纖維素P-11)

L-本丙醇100

2-氧代丁醋內(nèi) cLPHc-KqTOBUTYRIC cCID wo7ium ScLT 013-6-2

D-派啶-2-羧醋 D(+)-Pipqcolinic ccid 173-00-8
ALKALINEPHOSPHATASEPH9.54L#N/A

TBACNN,N-三丁基-1-丁錄化物25AR98%

果膠;粘膠質(zhì);植物性粘液質(zhì) Pqctin 9000-69-2

魚藤酮/[2R -( 2a α,6a α,12a α)-1,2,12a-四氫-8,9-二甲氧基-2-(1-甲基基)1苯并3,4-b糠酰2,3-h1苯并-6(6aH)-/Rotenone BR,90% 1 進(jìn)分

高嶺土/白陶土/瓷土/白土/Kaolin CP 500 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Interferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腎系膜細(xì)胞HRMC

牛腎細(xì)胞;MDBK

NCI-H23細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3NIH細(xì)胞 CM-R087大鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

RKO(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-01137000015) 500ml
人腎系膜細(xì)胞HRMC

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牛腎細(xì)胞;MDBK

NCI-H23細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3NIH細(xì)胞 CM-R087大鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

RKO(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-01137000015) 500ml
DiIC1(5) 碘化物100mg操作步驟人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3 大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人腦血管周細(xì)胞HBVP

CD82 Others Human CD82 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H035人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

A549, 人肺癌細(xì)胞系

Lec1 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

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