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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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BCECF AM1mg操作步驟

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更新時(shí)間:2017-07-20 09:09:08瀏覽次數(shù):144次

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BCECF AM1mg操作步驟如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

BCECF AM1mg操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
BCECF AM1mg操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
BCECF AM1mg操作步驟詳細(xì)說明書:

BCECF AM1mg操作步驟對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
司盤6025毫克28

(酸鈉)

一縮二乙二醇shēng huà shì jì容量:100

5--2-肖基本酚 5-Chloro-2-nitnophqnol 611-07-4

亞碲酸鹽卵黃增菌液shēng huà shì jì容量:1
碳酸鋇shēng huà shì jì容量:25

RNASIN RNA INHIBITOR(-20)NA

*酯酶(豬胰)100

2-丙烯?;?/span>-2-... 2-Acrylamido-2-methyl-1-propanesulfoni... 15214-89-8 100G 通用試劑

無水溴化鋰 litxium bromidq 7220-32-8
ALBUMIN,BOVINE(BSA),CRYSTALLINE牛血清白蛋白,組分V生物技術(shù)級(jí)米白色至棕黃色粉末COLDsigma

10026-11-6錄化錫 98%Zirconium tetrachloride

2-Cyanopyridine-3-boronic acid 874290-88-7

碳酸二甲酯(DMC) Dimethyl te,99% 616-38-6 100ML 通用試劑

potewwiumbromide鉀溴10BR97%
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCL

小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

HuH-7人肝癌細(xì)胞 Human

CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCL

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(10mL酶解緩沖液) 1mL

HuH-7人肝癌細(xì)胞 Human

CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
BCECF AM1mg操作步驟人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 人肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK-

IGFBP7 Others Human IGFBP7 / IBP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

BT-549人管癌細(xì)胞 BT-549 human breast duct carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

VSTM1 Protein Human 重組人 VSTM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MA891

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