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糖蛋白 PAGE 染液1套說明書

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糖蛋白 PAGE 染液1套說明書如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

糖蛋白 PAGE 染液1套說明書對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
糖蛋白 PAGE 染液1套說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
糖蛋白 PAGE 染液1套說明書詳細(xì)說明書:

糖蛋白 PAGE 染液1套說明書對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
刃天青shēng huà shì jì容量:100

PonceauS 10g/25g/100ml Amresco分裝

*鹽酸鹽100

6-羌基-2,5,7,8-四基本并二輕-2-羧醋 6-xy7noXY-2,5,7,8-TqTRcMqTHYLCHROMcN-2-CcRBOXYLIC cCID 23188-07-1

AGAROSEITAETS,500MG瓊脂糖Ⅰ型,超純級(jí)1000 TAETSRT
天青II1公斤

3073-87-81,4-(4-甲基-5-本基-2-噁唑)DImetxYL POPOP

溶壁酶100

芐基三丁基* Benzyltributylammonium bromide,98.5 % 25316-59-0 10G 通用試劑

甲硫醚 Dimethyl sulfide (99%,DMS) 75-18-3 100ML 通用試劑
AEP乙基25毫克BR,98%

4731-53-7三正辛基膦 90%TRI-N-OCTYLPHOSPHINE

D--ArabinoseD-樹膠醛糖25毫克BR100mM

2,3,4-三羥基 2,3,4-Trihydroxy,98% 2144-8-3 5G 通用試劑

磷鉬酸銨/二氧磷基鉬酸銨水合物/Ammonium phosphomolybdate hydrate AR,86.5%, 100 國產(chǎn)
FLRT2 Others Human FLRT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC

HK-2 人腎近曲小管上皮細(xì)胞

CM-R027大鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HuH-7人肝癌細(xì)胞

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1008 人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC

EPOR & CD131 Others Human EPOR & CD131 Homodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細(xì)胞

CM-R035大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

THP-1人單核白血病細(xì)胞

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002 人神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
糖蛋白 PAGE 染液1套說明書B淋巴母細(xì)胞;HMy2.CIR 人前列腺平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人正常肝細(xì)胞;L-02

HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞

HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

NCI-H292 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)

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