Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L操作步驟詳細說明書：

Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
β-乳球蛋白5克

PMS 1g Amresco分裝

二水合乙二酸，英文名或英文縮寫：Oxalic acid dihydrate，級別：CP，98.5%，規(guī)格：1公斤

8-壬烯醋 97% 8-NONqNOIC cCID 3164-67-8

乙酸鎘二水合物，英文名或英文縮寫：Cadmium acetate dihydrate，級別：CP，98%，規(guī)格：25克
*V，英文名或英文縮寫：Cefazolin wo7ium salt，級別：USP級，規(guī)格：1克

*相關(guān)物質(zhì)C Zidovudinq Rqlctqd CoMpound C;thyMinq 62-71-4

metxyl 5-bromo-1-benzothiopxene-2-carboxylate 7312-11-0

二甲氧基乙酸甲酯 Methyl dimethoxyacetate,97% 89-91-8 5G 通用試劑

生根粉/Rooting Powde 優(yōu)質(zhì)級 100克 國產(chǎn)/進口
ACRYLAMIDE丙烯酰胺蛋白組學級1KG1979-6-1RT

(粗卵清蛋白

三羥甲基基甲烷醋酸鹽，英文名或英文縮寫：TRIS acetate salt，級別：AR，規(guī)格：100克

輔酶 A Coqnzymq c 82-61-0

LACTOSEMONOHYDRATE乳糖單水合物美國國家處方級,ACS級,英國藥典,歐洲藥典級,日本藥典級白色至米白色粉末RTsigma
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

人前列腺成纖維細胞HPrF

白牦牛皮膚細胞;Yak-2

NCI-H596細胞，人肺腺鱗癌細胞 小鼠Mo-MuLv感染的3T3細胞,Mo-MuLV/3T3細胞 CM-R079大鼠冠狀動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

RH-35(大鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 12678017 LHC-8 MEDIUM 500 ml
人前列腺成纖維細胞HPrF

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

白牦牛皮膚細胞;Yak-2

NCI-H596細胞，人肺腺鱗癌細胞 小鼠Mo-MuLv感染的3T3細胞,Mo-MuLV/3T3細胞 CM-R079大鼠冠狀動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL

RH-35(大鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 12678017 LHC-8 MEDIUM 500 ml
Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 )50L操作步驟人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1 人食管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

人小梁網(wǎng)細胞RNAHTMC miRNA5 μg

ILKAP Others Human 人 ILKAP 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標記)

小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)

P388D1 小鼠淋巴樣瘤細胞