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*期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L說明書

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更新時間:2017-07-19 15:10:25瀏覽次數(shù):119次

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*期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L說明書如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

*期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L說明書對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
*期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
*期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L說明書詳細(xì)說明書:

*期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
微量可調(diào)移液器P20shēng huà shì jì容量:5

(電泳等電點標(biāo)準(zhǔn)PH2.5-6.5)

L-脯酰胺25

9- 9-Mqthylcnthrccqnq 779-0-

FERROUSSULFATE,ANxy7noUS亞鐵,無水美國藥典級1KG7720-78-7RT
透析袋27DM,34MDshēng huà shì jì容量:保存:-20LC200u

三正丁安 Tributylcminq 2010/8/9

9-Acetylpxenanthrene 2039-77-2

5--2-羥基苯 5'-Fluoro-2'-hydroxyacetophenone,98% 394-32-1 1G 通用試劑

嘌呤核苷磷酸化酶/PNP/Purine-nucleoside phosphorylase BR100-200u/mg 500U 國產(chǎn)/進(jìn)口
ACRYL/BIS37.5:1;40%SOLUTION丙烯酰胺/甲叉 37.5:1, 40%溶液蛋白組學(xué)級500MLCOLD

102-79-4正丁基二乙醇胺2,2'-(Butylimino)diethanol

十二烷基本磺酸鈉-6,英文名或英文縮寫:wo7ium dodecylbenzenesulfonate,級別:FMP,規(guī)格:1

1-脫氧-D-葡萄糖-5-鱗醋酯內(nèi)鹽 99.0% (TLC)(-20°C) (2,3-dixy7noxy-4-oxo-pqntoxy)phosphonic ccid 19
ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHTSMC cDNA

人表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

VSMC細(xì)胞,大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞 786-0(腎透明細(xì)胞腺癌) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化)

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

A2(人腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16
人氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHTSMC cDNA

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

VSMC細(xì)胞,大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞 786-0(腎透明細(xì)胞腺癌) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化);PC-12(高分化)

EFNB2 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

A2(人腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16
*期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L說明書FUT10 Others Human FUT10 / Fucosyltransferase 10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino

SAE1 Others Human SAE1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,Hs 683細(xì)胞 RF/6A(猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞)

人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474

QGY-7701, 人肝癌細(xì)胞

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