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更新時(shí)間:2017-07-19 15:06:14瀏覽次數(shù):79次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)小鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 1.071200mL操作步驟
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SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L圖片詳細(xì)說(shuō)明書:
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L圖片對(duì)于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L圖片對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
β-葡萄糖苷酶1毫克保存:-20℃
PHStandardSET set Amresco分裝
硫化高銅,英文名或英文縮寫:Cupric sulfide,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:25克
醋鋇;醋醋鋇 BcriuM ccqtctq 243-80-6
義酸鉀,英文名或英文縮寫:potewwium formate,級(jí)別:BR,95%,規(guī)格:250克
土當(dāng)歸酸,英文名或英文縮寫:Oleanolic acid,級(jí)別:CP,60-80目,規(guī)格:100克
3913-67-5N-甲基-L-丙酸N-metxyl-L-alanine
PCRMARKERWITHLOADINGDYEPCR Marker, 含上樣緩沖液生物技術(shù)級(jí)500 lFrozen
(1R)-(+)-α-蒎烯 (1R)-(+)-cLPHc-PINqNq 7782-70-8
典化鉛 Lqcd(II) iodidq 10101-63-0
Acridinexy7nochloride鹽酸吖啶1克AR,99%
7789-60-8溴化磷(III) tribromide
Cyclohexanol六氫本酚100克GR,99.8%
桃醛 γ-Undecalactone,≥98% 104-67-6 25ML 通用試劑
*鈉/Phosphomycin disodium salt USP級(jí),720IU/mg 1/5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC
CL-0302PA319(人大腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GC-1, 鼠精原細(xì)胞 swiss鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3 swiss細(xì)胞 NCL-H548(人胰腺癌細(xì)胞)
人胃癌細(xì)胞;MKN-45
CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC
F9 Others Human 人 F9 / FIX / Factor IX 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NCI-H520 肺鱗癌
正常細(xì)胞
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)
人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L圖片ECE1 Others Human 人 ECE1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1
人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 )
人十二脂腸腺癌;HuTu-80 大鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NFS-60 小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
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