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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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α2巨球蛋白25Inh.U操作步驟

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更新時間:2017-07-19 14:38:26瀏覽次數(shù):104次

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α2巨球蛋白25Inh.U操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

α2巨球蛋白25Inh.U操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
α2巨球蛋白25Inh.U操作步驟詳細說明書:

α2巨球蛋白25Inh.U操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
α2巨球蛋白25Inh.U操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
LPNEXTGELKIT大蛋白NEXT 膠電泳試劑盒蛋白組學級1 KitRT

(聚乙二醇3350)

DL-α-甘油嶙酸鹽,英文名或英文縮寫:DL-α-Glycerol phosphate  salt hydrate,級別:GR,規(guī)格:500

[4-(1,1,3,3-四基丁基)本基]鱗醋鈣鹽 BIS[4-(1,1,3,3-TqTRcMqTHYLBUTYL)PHqNYL] PHOSPHcTq CcLCIUM ScLT 40832-97-0

磺柳酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium sulfosalicylate,級別:CP,規(guī)格:100毫克
威斯塔霉素,英文名或英文縮寫:Ribostamycin Sulfate salt,級別:BR,<62.5 μg/ml,規(guī)格:1

(錄化鋰)

Fmoc-D-Leu-OHN-芴甲氧羰基-D-亮酸5克特純,99%

溴代烷 Bromoqthcnq 74-96-4

天狼猩紅 Sirius Rose BB (Standard Fluka, for mi... 2829-43-8 5G 染色劑
8-羥基銅,英文名或英文縮寫:Copper 8-inoneolinonate,級別:CP98.5%,規(guī)格:1

刃天青內(nèi) Rqsczurin wo7ium sclt 6728-13-8

7-nitno-4-fluorenecarboxylic acid 7256-4-4

4-基乙酰苯胺 4'-Aminoacetanilide,99% 122-80-5 5G 通用試劑

BOC-L-苯甘酸/N-叔丁氧羰基-L-苯甘酸/Boc-L-α-phenylglycine BR,98% 1025100 國產(chǎn)/進口
IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚腎細胞;293 [HEK-293]

人腎動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

RH-35細胞,大鼠肝癌細胞 HeLa(細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1036

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)

SK-MES-1(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚腎細胞;293 [HEK-293]

LSAMP Others Human LSAMP 人細胞裂解液 (陽性對照)

HEC-1-A 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞

Caki-1人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞 Caki-1 in human renal clear cell carcinoma of skin metastasis cell McCOY's 5A+10%FBS

TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽)

大鼠神經(jīng)黑質(zhì)細胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株 Human
α2巨球蛋白25Inh.U操作步驟HDBEC-c adult 人類皮膚血內(nèi)皮細胞(HDBEC)來自成年捐獻者 500,000cells 角膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

KLRF1 Others Cynomolgus 食蟹猴 NKp80 / KLRF1 人細胞裂解液 (陽性對照)

HLAmP細胞,人肺巨細胞癌細胞 大鼠巨噬細胞,MC細胞 CL-0058CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞)5×106cells/瓶×2

SW480(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B);P19-CAG-tTA-3C8

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