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更新時間:2017-07-19 14:33:03瀏覽次數(shù):127次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒1000 次圖片對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒1000 次圖片產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒1000 次圖片詳細說明書:
改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒1000 次圖片對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
PMSF本蛋白組學級25G329-98-6RT
penefonmeldehyde 100g/250g/1kg/5kg原裝 Sigma P6148
十二烷基乙基二甲基溴化,英文名或英文縮寫:EDDAB,級別:BS,規(guī)格:25毫克
減式?jīng)]食子醋鉍 BisMuth Subgcllctq (cS) 1999/6/3
Hank′s液,英文名或英文縮寫:Hank′s solution,級別:BR,規(guī)格:100克
微量可調八道移液器P10 支 BioHit原裝
GinsenosideRf人參皂甙Rf5克色固
聚炳烯 Polypropylqnq 9003-07-0
乙二醛縮雙(鄰基酚)/乙二醛縮雙鄰羥苯胺/乙二醛雙(2-羥基苯胺)/鈣紅/GBHA CP 10克 國產(chǎn)/進口
二乙酰一肟/2,3-丁二酮一肟/聯(lián)乙酰一肟/雙乙酰一肟/甲基肟乙基甲酮/丁二酮單肟/2,3-丁二酮肟/2,3-丁烷二酮一肟/肟乙基甲酮/丁二酮一肟/二甲基乙二酰一肟/Diacetyl monoxime AR, 10克 國產(chǎn)/進口
767shēng huà shì jì容量:RT1克
7087-68-5二異丙基乙胺etxyldiisopropylamine
T1N3肉湯shēng huà shì jì容量:2~8℃150毫升
7-甲基 7-Methyl,97% 612-60-2 250MG 通用試劑
4-正丁基苯胺 4-Butylaniline,97% 104-13-2 25G 通用試劑
大鼠神經(jīng)皮質細胞(RNc)(1×106)
人胚肺細胞系;KuMA
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
615小鼠癌瘤株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse
CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺細胞系;KuMA
大鼠神經(jīng)皮質細胞(RNc)(1×106)
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
615小鼠癌瘤株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse
CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒1000 次圖片GBC-SD(人膽囊癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚腎細胞(SV40T和EBNA1基因修飾細胞))5×106cells/瓶×2 盤羊皮膚細胞;ASHS3
小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1
C10ORF54 Others Human 人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 人細胞裂解液 (陽性對照)
SF767細胞,人腦瘤細胞 陰溝腸桿菌 人主動脈內皮細胞總RNAHAEC tRNA
RKO-E6(人結腸癌轉基因細胞) 5×106cells/瓶×2
U-87 MG人腦星形膠質母細胞瘤 U-87 MG of brain astrocytic blastoma DMEM+10% FBS
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