當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>RNA/DNA提取>>蛋白質研究產品>> *標簽蛋白染色試劑盒10 次操作步驟
*標簽蛋白染色試劑盒10 次操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
*標簽蛋白染色試劑盒10 次操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
*標簽蛋白染色試劑盒10 次操作步驟詳細說明書:
*標簽蛋白染色試劑盒10 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
TRIS-GLYCInepUFFER,10XSOLUTIONTris-甘酸緩沖液蛋白組學級1LCOLD
(多效唑)
戊基奈,英文名或英文縮寫:Oxyvanadium phthaloyenine,級別:試劑級,98%,二水物,規(guī)格:500毫克
氧化鉍;三氧化二鉍 BisMuth trioxidq;BisMuth yqllow;BisMuthous oxidq 1304-76-3
偶氮二異丁酸二甲酯,英文名或英文縮寫:AIBME,級別:BR,90%,規(guī)格:5克
微量可調八道移液器P50 支 BioHit原裝
Glycinetertbutylesterxy7nochloride鹽酸甘酸叔丁酯5克BR,98%
聚烯亞安 Polyqthylqniminq 2987/6/8
乙基黃原酸鉀/乙基二硫代碳酸鉀/黃酸鉀/乙原磺酸鉀/O-乙基二硫代碳酸酯鉀鹽/乙基二硫化碳酸鉀/O-乙基二硫代碳酸鉀/Potassium ethyl xanthate AR,95%, 100克 國產/進口
法尼醇/法呢醇/3,7,11-*基-2,6,10-十二烷三烯-1-醇/合金歡醇/Farnes
719陰離子交換樹脂1KU
1988-9-52-乙基丁酸;二乙基乙酸2-etxylbutyric acid;2-etxylbutanoic acid;Dietxylacetic acid;3-Pentanecarboxylic acid;α-etxylbutyric acid
5-bromonicotinonitnile 35590-37-5
丙烯酸-2-苯氧基乙酯 Ethylene glycol phenyl acrylate,... 48145-04-6 25ML 通用試劑
腺苷-3’,5’-環(huán)鱗
RCN3 Others Human 人 RCN3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺二倍體細胞;HL
C57BL/6小鼠脂肪間質干細胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells
FBM細胞,胎兒骨髓間充質細胞 嬰兒雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406
U14(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2
HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM
人胚肺二倍體細胞;HL
RCN3 Others Human 人 RCN3 人細胞裂解液 (陽性對照)
C57BL/6小鼠脂肪間質干細胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells
FBM細胞,胎兒骨髓間充質細胞 嬰兒雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406
U14(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2
HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM
*標簽蛋白染色試劑盒10 次操作步驟HDLEC-c 人類皮膚淋巴管內皮細胞(HDLEC)來自少年者 500,000cells 骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
外周血白細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
APLP1 Others Human 人 APLP1 / Amyloid-like protein 1 人細胞裂解液 (陽性對照)
PG-BE1細胞,人肺巨細胞癌(PG)的高轉移亞系 敘利亞倉鼠腎細胞,BHK-21細胞 CL-0034BHK-21(倉鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2
STO(小鼠胚成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256
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