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更新時間:2017-07-18 16:28:59瀏覽次數(shù):139次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)鎳柱介質(zhì)2mL說明書對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
鎳柱介質(zhì)2mL說明書產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
鎳柱介質(zhì)2mL說明書詳細說明書:
鎳柱介質(zhì)2mL說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
十四酸,英文名或英文縮寫:Myristic acid,級別:BR,50%,規(guī)格:25克
NBT 200mg/1g Amresco分裝
SDS10%SDS溶液超純級100MLRT
三溴化硼;溴化硼 Boron tribroMidq 1094-33-4
Carbolfuchsin石炭酸品紅1克FMP,84%
維生素B3/*/菸酸/3-羧酸/-3-羧酸/3-噼啉酸/-3-/3-羥酸/-3-羥酸/3-噼啉酸/尼克酸/酸/氮苯酸-3/素/VB3 CP,99% 25克 國產(chǎn)/進口
PHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS)20XCONCENTRATE,pH7.5PBS溶液超純級透明無混濁液體RTsigma
帕拉派克 N PORcPcK N (100-200 MqSH cSTM) FOR GC 37311-02-0
乙酸鋰/醋酸鋰/二水醋酸鋰/Lithium acetate dihydrate AR,9
5-溴水楊酸,英文名或英文縮寫:5-Bromosalicylic acid,級別:CP,規(guī)格:500毫克
硅同 DC-702 Siliconq DC-702
9H-Fluorene, 9-butyl- 3952-42-9
異佛爾酮二胺 3-Aminomethyl-3,5,5-trimethylcyclohexy... 2855-13-2 100ML 通用試劑
DEAE葡聚糖/DEAE Dextran 高純,分子量50萬 10克 國產(chǎn)/進口
小鼠條紋神經(jīng)細胞(MN-s)(1×106)
人腦血管平滑肌細胞RNAHBCSMC miRNA5 μg
狗腎細胞;Super Tube
小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 其它
TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腦血管平滑肌細胞RNAHBCSMC miRNA5 μg
小鼠條紋神經(jīng)細胞(MN-s)(1×106)
狗腎細胞;Super Tube
小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 其它
TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)
鎳柱介質(zhì)2mL說明書EPHB2 Others Human 人 EphB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人前脂肪細胞-皮下HPA-s
ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
HL-7702細胞,肝細胞 人結(jié)腸腺癌細胞,LS180細胞 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]
長尾綠猴胚胎細胞;4179
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