亲和层析柱50 mL操作步骤 返回列表页

亲和层析柱50 mL操作步骤详细说明书：

亲和层析柱50 mL操作步骤产品及特点：
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。
2. 安全，将实验人员接触粉末状丙烯酰胺的可能降到低。
3. 灵活，分开提供的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺便于配制各种比例和浓度的 SDS-PAGE，满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4. 使用改良的浓缩胶缓冲液，由于其含有染料，制备的浓缩胶呈蓝色，便于上样时识别加样孔。
5. 电泳后可直接用于考染、银染、Western 杂交等实验。
亲和层析柱50 mL操作步骤对于组织样品：
1. 把*切成细小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF， 使 PMSF 的终浓度为 1mM。
3. 按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈 vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是 比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
亲和层析柱50 mL操作步骤对于培养细胞样品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF， 使 PMSF 的终浓度为 1mM。
2. 裂解细胞 2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血 清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后，细胞就会被裂解。 2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分 裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔细胞加入 150 微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高 可以适当加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
LEUPEPTIN亮抑酶肽超纯级25MG103476-89-7Frozen

(啶酮酸)

甜菊糖甙，英文名或英文缩写：Stevioside，级别：BR，98%，规格：10克

三拂化硼-二迷络合物 Boron trifluoridq dimqthyl qtqrctq 323-4-4

伊红B，英文名或英文缩写：Eosin B，级别：高纯，99%，规格：250毫克
维生素B31KU2～8℃，避光

464-06-22,2,3-*基丁烷;异丙基*基甲烷;五甲基乙烷2,2,3-Trimetxylbutane;Triptane;Pentametxylethane 

2-Chloro-5-cyanopxenyl boronic acid pinacol ester 863868-30-8

土木香内酯标准品 Alantolactone,≥97.0% 546-43-0 20MG 通用试剂

四硼醋内，十水合 Nc
5-溴*shēng huà shì jì容量：100克

磺安基嘧啶 SulfcMqrczinq 17-79-7

2,4-Bis(benzyloxy)pyrimidine-5-boronic acid 70523-24-9

乙酰乙酰苯胺 Acetoacetanilide,≥99.5% 102-01-2 250G 通用试剂

L-苏醇/H-苏醇/L-Threoninol BR，97%， 1克 国产/进口
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脑血管平滑肌细胞cDNAHBVSMC cDNA

小鼠肝癌瘤株;H22

GBC-SD细胞，人胆囊癌细胞 人APP基因转染CHO细胞株,7WD10细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1

Li-7(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 间充质干细胞生长培养基DXF—无血清培养基 500ml
人脑血管平滑肌细胞cDNAHBVSMC cDNA

NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠肝癌瘤株;H22

GBC-SD细胞，人胆囊癌细胞 人APP基因转染CHO细胞株,7WD10细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1

Li-7(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 间充质干细胞生长培养基DXF—无血清培养基 500ml
亲和层析柱50 mL操作步骤COQ7 Others Human 人 COQ7 人细胞裂解液 (阳性对照)

tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-3E6

人脑膜细胞 (HMC)( 5×105 )

人结直肠腺癌细胞;Caco-2 大鼠肠微血管细胞*培养基 100mL

EAC 小鼠艾氏腹水癌细胞

肠动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)