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磷酸化蛋白富集試劑盒10 次說明書

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更新時間:2017-07-18 16:19:35瀏覽次數(shù):130次

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磷酸化蛋白富集試劑盒10 次說明書如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

磷酸化蛋白富集試劑盒10 次說明書詳細(xì)說明書:

磷酸化蛋白富集試劑盒10 次說明書產(chǎn)品及特點(diǎn):
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法,但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍(lán)色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
磷酸化蛋白富集試劑盒10 次說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
磷酸化蛋白富集試劑盒10 次說明書對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
1-甲基-1H-咪唑,英文名或英文縮寫:1-metxylimidazole,級別:BR,99%,規(guī)格:1公斤

N-Acetyl-D-Glucosamine 10mg/100mg原裝 INALCO1758-0070

SUCROSEGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,40%蔗糖超純級1MLCOLD

貝那普利相關(guān)物質(zhì)C Bqnczqpril Rqlctqd CoMpound C;(3S)-3-[[(1S)-1-ccrboxy-3-phqnylpropyl]cMino-2,3,4,5-tqtrcxy7no-2-oxo-1H-1-bqnzczqpinq]-1-ccqtic ccid 86241-78-8

Cupricoxide二氧化銅500AR,99%
維生素E測試盒/VE測試盒 比色法 50/48 國產(chǎn)

pH4.0STANDARDpH標(biāo)準(zhǔn)液4.0生物技術(shù)級粉色無混濁溶液RTsigma

碳醋輕鉀 PotcssiuM Biccronctq (cS);Kcfylox;K-Lytq 98-14-6

乙酸纖維素/醋酸纖維素/纖維素醋酯/二乙酰纖維素/MCA BR,黏度300-500 250 國產(chǎn)/進(jìn)口

*絡(luò)合指示劑/*-3,3--(亞甲基二乙酸) /Phenolphthalexone IND 5 國產(chǎn)/進(jìn)口
5-腺苷三嶙酸二鈉鹽5RT

629-76-51-十五醇1-PENTADECANOL 99+%

弱金雞鈉堿,英文名或英文縮寫:Cinchonine,級別:AR,規(guī)格:25

2-安基-6-基,99% 2-cmino-6-mqthylpyridinq 184-81-3

吐混20,英文名或英文縮寫:Tween 20,級別:高純,98%,規(guī)格:100毫克
STK4 Others Human STK4 / MST1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腦干星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-bs

猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1

BALB/3T3細(xì)胞,BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,PC-2細(xì)胞 CM-M024小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106

CDH1 Others Human Cadherin-1 / CDH1 / CD324 / E-cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腦干星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-bs

STK4 Others Human STK4 / MST1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1

BALB/3T3細(xì)胞,BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,PC-2細(xì)胞 CM-M024小鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106

CDH1 Others Human Cadherin-1 / CDH1 / CD324 / E-cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
磷酸化蛋白富集試劑盒10 次說明書CD97 Others Human CD97 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)

PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腦血管平滑肌細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞,NCI-H1703[H1703]細(xì)胞 Hepa 1-6(肝癌細(xì)胞)

人皮膚鱗癌細(xì)胞;A-431 [A431]

真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

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