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細菌膜蛋白質微量提取試劑盒50 次操作步驟

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更新時間:2017-07-18 16:17:29瀏覽次數(shù):128次

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細菌膜蛋白質微量提取試劑盒50 次操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

細菌膜蛋白質微量提取試劑盒50 次操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
細菌膜蛋白質微量提取試劑盒50 次操作步驟產(chǎn)品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
細菌膜蛋白質微量提取試劑盒50 次操作步驟詳細說明書:

細菌膜蛋白質微量提取試劑盒50 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
eetonEACS1L67-4-1RT

(肌紅蛋白)

鳥苷-5'-二嶙酸二鈉鹽,英文名或英文縮寫:5'-GDP,2Na,級別:BR,98%,規(guī)格:2500u

本全 Bqnzcldqhydq (List ChqMiccl);Bqnzoyl hydridq;Bqnzqnq ccroncl 100-2-7

反式-3-吲哚丙烯酸,英文名或英文縮寫:IAA,級別:超純,98%,規(guī)格:5KU
維生素H,英文名或英文縮寫:D-Biotin,級別:IND,規(guī)格:5毫克

7146-15-8D-纈酸乙酯鹽酸鹽metxyl D-valinate xy7nochloride

BOCO2BOC-酸酐100BR99%

1,2-二錄烯 98% MIXTURE OF C 1,2-Dichloro-2-qthoxyqthcnq 63-46-1

糖醋摸米松 MoMqtcsonq Furoctq 83919-3-7
5-羥基吲哚乙酸128℃,避光

7439-89-6還原鐵粉Iron powder reduced

磺酰羅丹明B100KU保存:-20

2-Iodo,98% 615-37-2 25G 通用試劑

肌酸激酶測試盒/CK測試盒 比色法 50/24 國產(chǎn)
ACLY Others Human ACLY / acly / ATP citrate lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人毛細胞RNAHHDPC miRNA5 μg

大耳山羊腎細胞;LDG-2

SK-N-MC細胞,神經(jīng)上皮瘤細胞 鼠骨髓瘤細胞,P3/NS1/1-Ag4-1細胞 人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]

小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人毛細胞RNAHHDPC miRNA5 μg

ACLY Others Human ACLY / acly / ATP citrate lyase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大耳山羊腎細胞;LDG-2

SK-N-MC細胞,神經(jīng)上皮瘤細胞 鼠骨髓瘤細胞,P3/NS1/1-Ag4-1細胞 人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]

小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細胞裂解液 (陽性對照)
細菌膜蛋白質微量提取試劑盒50 次操作步驟IL11RA Others Human IL11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照)

T-109B彈性蛋白酶(100mL酶解緩沖液)10mL

F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細胞裂解液 (陽性對照)

白牦牛皮膚細胞;Yak-2 橫紋肌瘤細胞,A673細胞 NAMALWA(Burkitt's 淋巴瘤細胞)

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;Mao

成纖維細胞生長添加物(不含動物成分)FGS-acf

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