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克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次使用說(shuō)明書(shū)

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克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次使用說(shuō)明書(shū)是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次使用說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲(chóng)桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲(chóng)病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲(chóng)病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次使用說(shuō)明書(shū)詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次使用說(shuō)明書(shū)規(guī)格及成分:

克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次使用說(shuō)明書(shū)使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無(wú)菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋?zhuān)绶殖?/span> 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。
HA重組甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

phosphor-SMAD(p-Ser425 0.5mgphosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic 磷酸化SMAD(p-Ser425)抗原

COCH重組人 Cochlin / COCH 蛋白 (short isoform, His 標(biāo)簽) Protein

KIT Protein Human 重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FGF2 Protein Human 重組人 bFGF / FGF2 蛋白
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

瘦素(LEP)重組蛋白 Recombinant Leptin (LEP)

IL13重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

SCGB3A1重組人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD97 Protein Human 重組人 CD97 蛋白 (His 標(biāo)簽)
phosphor-SMAD(p-Ser425 0.5mgphosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic 磷酸化SMAD(p-Ser425)抗原

KIT Protein Human 重組人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGF2 Protein Human 重組人 bFGF / FGF2 蛋白

COCH重組人 Cochlin / COCH 蛋白 (short isoform, His 標(biāo)簽) Protein
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)免疫試劑盒 Human ANKRD1 ELISA Kit

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50/48

Ratmatrixmetalloproteinase13,MMP-13ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISA試劑盒人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanlipocalin2,LCN2ELISAKit人細(xì)胞色素b561(cytb561)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素15(IL-15)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒

Humancross-linkedC-opeptidesofTypecollagen,CCPELISAKit 人Ⅰ型前膠原C末端肽(CCP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCaspase12,Casp-12ELISA試劑盒人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因棉花MON15985品系基因檢測(cè)試劑盒20

Humansmallbreastepithelialmucin,SBEMELISAKit人小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
克必隆常態(tài)轉(zhuǎn)化液20 次使用說(shuō)明書(shū)人脫氫表雄(DHEA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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