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更新時間:2017-07-18 12:51:21瀏覽次數(shù):264次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*產(chǎn)品及特點:
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個 mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重組臂,Tn7R 和 Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動子、多克隆位點和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 或 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*規(guī)格及成分:
SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42℃熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個離心管中加入 900 μL 無菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37℃ 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時。
6. 用 SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各個梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37℃培養(yǎng) 24-48 小時。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,視平板上菌落生長情況決定去留。
LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原
STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
銅藍(lán)蛋白(CP)重組蛋白 Recombinant Ceruloplasmin (CP)
MERTK重組人 MERTK / Mer 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
RPN2重組人 RPN2 / Ribophorin II 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AGO1 Protein Human 重組人 AGO1 / Argonaute 1 / EIF2C1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原
INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
LAG3重組大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BMPR1A Protein Mouse 重組小鼠 ALK-3 / BMPR1A 蛋白 (His 標(biāo)簽)
STAT1重組人 STAT1 / p91 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*α1(Thymosin α1)免疫試劑盒 Human Thymosin α1 ELISA Kit
軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: LP Ab-IgA ELISA Kit
RatL-LactateDehydrogenase,L-LDHELISA試劑盒大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISA試劑盒人生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLegionellapneumophilaantigen,LPAgELISAKit人軍團(tuán)菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human glycogen phosphorylase MM (GP-MM) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒
HumanproteinkinaseB,PKBELISAKit 人蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBonemorphogeneticproteinreceptorⅡ,BMPR-ⅡELISA試劑盒人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織DNA損傷彗星*熒光檢測試劑盒20次
HumanStemCellFactorReceptor,SCFRELISAKit人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10*人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*受體(FOLR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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