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lambda(λ)DNA5μg*

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更新時(shí)間:2017-07-18 12:41:30瀏覽次數(shù):152次

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lambda(λ)DNA5μg*是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。

lambda(λ)DNA5μg*產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是采用特殊工藝處理得到的大腸桿菌 DH10 Bac 感受態(tài)細(xì)胞,適用于昆蟲桿狀病毒 Bac-to-Bac 系統(tǒng)中同源重組的菌株,用于產(chǎn)生重組 Bacmid。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),本產(chǎn)品轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107CFU/μg。 DH10Bac 細(xì)胞包含親本 Bacmid bMON14272 和輔助質(zhì)粒 pMON7124。親本 Bacmid 包含一個(gè) mini-F 復(fù)制子、*抗性基因、att Tn7 位點(diǎn)和 lac Zα-互補(bǔ)因子。輔助質(zhì)粒包含 tns ABCD 區(qū)域,該區(qū)域提供了 mini-Tn7 從供體質(zhì)粒插入親本 Bacmid 靶位點(diǎn)所需要的轉(zhuǎn)座蛋白。供體如 pFastBac 系列質(zhì)粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R Tn7L 同源重組臂,Tn7R Tn7L 之間包含*抗性基因、昆蟲病毒多角體基因啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信號(hào)。當(dāng)含有靶基因 pFastBac 的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到 DH10Bac 細(xì)胞后,發(fā)生重組后就可產(chǎn)生重組 Bacmid,提取純化重組 Bacmid 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞 Sf9 Sf21 就可以包裝產(chǎn)生昆蟲病毒。此外,DH10Bac 細(xì)胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的產(chǎn)物可以實(shí)現(xiàn)β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)現(xiàn)象,用于重組 bacmid 的藍(lán)白斑篩選。
lambda(λ)DNA5μg*規(guī)格及成分:

lambda(λ)DNA5μg*使用方法:
1. 制備含有如下抗生素的 LB 固體平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal40 μg/mL IPTG。
2. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100 μL,可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
3. 待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入 1-10 ng 重組質(zhì)粒,用移液器輕輕吹打混勻,冰浴 30 分鐘。
4. 42熱擊 90 秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置 2-3 分鐘。
5. 每個(gè)離心管中加入 900 μL 無(wú)菌的 SOC(不含抗生素),混勻后置于 37 搖床, 200rpm 振蕩培養(yǎng) 4 小時(shí)。
6. SOC 培養(yǎng)基進(jìn)行 10 倍梯度稀釋,如分成 3 個(gè)稀釋梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 100 μL 的各個(gè)梯度的培養(yǎng)物用于涂布。等平板中的液體*吸收后,倒置平板, 37培養(yǎng) 24-48 小時(shí)。 8. 保留剩余的菌液保存于 4,視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。
EPHA1重組小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)重組蛋白 Recombinant Hexosaminidase B Beta (HEXb)

NAA10重組人 NAA10 / ARD1A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

ACVR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ACVR2B / ACTRIIB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

信號(hào)素4B(SEMA4B)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 4B (SEMA4B)

TNFRSF10B重組人 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

NLGN4X重組人 NLGN4X 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SERPINI1 Protein Human 重組人 SerpinI1 / Neuroserpin 蛋白 (His 標(biāo)簽)
*脫羧酶2(GAD2)重組蛋白 Recombinant Glutamate Decarboxylase 2, Acid (GAD2)

IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白

PGF重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 Protein

其他哺乳動(dòng)物

CCL27重組人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA試劑盒 ,英文名: FOS ELISA Kit

人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit 96T/48T

大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)免疫試劑盒 Rat Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit

英文名稱RatCCL1ELISAkit大鼠CCL1ELISAkit規(guī)格:96T/48T

藍(lán)色熒光細(xì)胞核染色分析試劑盒100

ELISAKitFⅡ人*Ⅱ規(guī)格:48T/96T
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat corticosterone / corticosterone (CORT) ELISA Kit 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒

Humanapelin12,AP12ELISAKit apelin12(AP12)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISA試劑盒人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物種子活性葉綠體分離試劑盒20

HumanT-cellacuymphoblasticleukemiaantigen,TALLA-1ELISAKitT細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
lambda(λ)DNA5μg*人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂蛋白aLp-aELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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