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更新時間:2017-07-18 12:15:26瀏覽次數(shù):180次
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真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次保存產(chǎn)品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合.
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次保存使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
19(R)-hydroxy Prostaglandin F1α (500 ug) 9。alpha。,11。alpha。,15S,19R-tetrahydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 19(R)-hydroxy PGF1α; 19(R)-hydroxy Prostaglandin F1α
7-methyl Guanosine (100 mg) 7-
*溶液(50mg/ml)(6X10ML) Gentamicin Solution (50mg/ml), Contains 50mg/ml gentamicin. Sterile solution.
Sp-Cyclic AMPS (sodium salt) (5 mg) cyclic 3’,5’-[hydrogen (S)-phosphorothioate] adenosine, monosodium salt; Sp-cAMPS; Sp-Cyclic AMPS (sodium salt)
Eicosapentaenoic Acid methyl ester (100 mg) 5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid, methyl ester; EPA methyl ester; Eicosapentaenoic Acid methyl ester
Halochondrine A, Ammonium Salt; OA Okadaic acid, Ammonium Salt
Corey Lactone Aldehyde Benzoate (500 mg) [3aR-(3a。alpha。,4。alpha。,5。beta。,6a。alpha。)]5-(benzoyloxy)hexahydro-2-oxo-2H-cyclopenta[b]furan-4-carboxaldehyde; Corey Lactone Aldehyde Benzoate
*標記*基化組蛋白H3K9多肽 Biotinylated Trimethyl Histone H3K9 Peptide (200 ul)
(-)-AS 115 (100 ug) 2-fluorophenyl-(2-(((1R,2S)-2-(butoxymethyl)cyclohexyl)methoxy)ethyl)carbamate; (-)-AS 115
Boldenone Cypionate (25 mg) 17β-hydroxy-androsta-1,4-dien-3-one cyclopentanepropionate
Efavirenz (50 mg) (4S)-6-chloro-4-(2-cyclopropylethynyl)-1,4-dihydro-4-(trifluoromethyl)-2H-3,1-benzoxazin-2-one; DMP 266|EFV|L-743,726; Efavirenz
TGX-221 (100 ug) TGX-221, 7-methyl-2-(4-morpholinyl)-9-[1-(phenylamino)ethyl]-4H-pyrido[1,2-a]pyrimidin-4-one
96-Well Clear Bottom Black Culture Solid Plate (1 ea) 96-Well Clear Bottom Black Culture Solid Plate
SR 1078 (1 mg) N-[4-[2,2,2-trifluoro-1-xy7noxy-1-(trifluorometxyl)etxyl]pxenyl]-4-(trifluorometxyl)-benzamide
yenine 5。5 單酸 [相當于Cy5。5酸] yenine 5。5 mono acid [equivalent to Cy5。5 acid]
Bisindolylmaleimide I (25 mg) 3-[1-[3-(dimetxylamino)propyl]-1H-indol-3-yl]-4-(1H-indol-3-yl)-1H-pyrrole-2,5-dione; BIM I|GF 109203X|G
O-Arachidonoyl Ethanolamine (xy7nochloride) (10 mg) O-(2-aminoetxyl)-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenester, monoxy7nochloride; Arachidonic Acid-(2-aminoetxyl)-ester|O-AEA|Virodhamine; O-Arachidonoyl Ethanolamine (xy7nochloride)
N2-1H-Benzimidazol-6-yl-N4-(5-cyclopropyl-1H-pyrazol-3-yl)-2,4-pyrimidinediamine APY29
醋酸鉛瓊脂250g用于細菌的硫化氫試驗。
芽孢桿菌培養(yǎng)基 250g 用于芽孢桿菌平板計數(shù)
副溶血性弧菌增菌液 250 用于副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)
Dey/Engley中和瓊脂基礎250g/瓶用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的培養(yǎng),每升培養(yǎng)基中需添加0204incubationmediaDey/Engley中和瓊脂基礎250g/瓶用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的培養(yǎng),每升培養(yǎng)基中需添加0204
XLD培養(yǎng)基平板(9cm) 10個/包 選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門氏菌
BufferedSodiumChloridePeptoneSolutionpH7.0
BPLS Agar Brilliant-green phenol-red-lactose sucrose agar 1.07232.0500 MERCK默克 incubation media BPLS Agar Brilliant-green phenol-red-lactose sucrose agar 1.07232.0500 MERCK默克
TyrosineAgarBase 500g 用于蠟樣芽孢桿菌的L-*分
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次保存BF839BacteriumCountSelectiveMedium
50062 BR 30kg incubation media 50062 BR 30kg
鰒發(fā)光桿菌 支/瓶
VTMBroth
30%DextroseBroth
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