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更新時間:2017-07-17 13:14:37瀏覽次數(shù):110次
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dGTP 溶液,100mM0.5mL圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
dGTP 溶液,100mM0.5mL圖片產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
dGTP 溶液,100mM0.5mL圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據引物的(G+C)%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
16,16-dimethyl Prostaglandin E2 (50 mg) 9-oxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 16,16-dimethyl PGE2; 16,16-dimethyl Prostaglandin E2
Clorgyline (hydrochloride) (10 mg) N-2,4-Dichlorophenoxypropyl-N-methylpropargylamine; N-[3-(2,4-dichlorophenoxy)propyl]-N-methyl-2-propyn-1-amine, monohydrochloride
錄化鈉(500GM) Sodium Chloride, High purity grade.
L-(+)-Ergothioneine (5 mg) αS-carboxy-2,3-dihydro-N,N,N-trimethyl-2-thioxo-inner salt-1H-imidazole-4-ethanaminium; 2-Mercaotohistidine betaine|NSC 7175; L-(+)-Ergothioneine
Sulpho NONOate (100 mg) disodium (E)-1-sulfonatodiazen-1-ium-1,2-diolate; Sulpho NONOate
4-Aminobenzoic hydrazide; MPO Inhibitor; 4-ABH Myeloperoxidase Inhibitor
PtdIns-(5)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt) (500 ug) 1-(1,2-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-5-phosphate, diammonium salt; DPPI-5-P1; PtdIns-(5)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt)
Activated SureLight Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP) (1 mg) Activated SureLight Peridinin-Chlorophyll Protein Complex (PerCP)
NSC 23766 (hydrochloride) (5 mg) N6-[2-[[4-(diethylamino)-1-methylbutyl]amino]-6-methyl-4-pyrimidinyl]-2-methyl-4,6-diamine, trihydrochloride; NSC 23766 (hydrochloride)
Silodosin (10 mg) KMD-3213; 2,3-dihydro-1-(3-hydroxypropyl)-5-[(2R)-2-[[2-[2-(2,2,2-trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl]amino]propyl]-1H-indole-7-carboxamide
JWH 081 4-hydroxynaphthyl metabolite (1 mg) (4-hydroxy-1-naphthalenyl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-methanone; JWH 081 4-hydroxynaphthyl metabolite
DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 3.5 kDa
nitnotyrosine Affinity Sorbent (200 ug) nitnotyrosine Affinity Sorbent
Nullscript (5 mg) N-xy7noxy-1,3-dioxo-1H-benz[de]isoinoneoline-2(3H)-but*
鬼筆環(huán)肽-iFluor 594偶聯(lián)物 Phalloidin-iFluor 594 Conjugate
Eicosapentaenoyl Ethanolamide-d4 (5 mg) N-(2-xy7noxyetxyl-1,1’,2,2’-d4)-5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenamide; EPEA-d4; Eicosapentaenoyl Ethanolamide-d4
Olvanil (5 mg) N-[(4-xy7noxy-3-metxoxypxenyl)metxyl]-9Z-octadecenamide; N-Vanillyloleamide|NE 1955Olvanil
Retro-2(cycl); Retro-2
GCAgar
沙門氏菌富集肉湯 incubation media 沙門氏菌富集肉湯
*基礎 250g 加入脫纖維羊血或兔血,制成*,用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基300ml/袋*霉菌、酵母菌計數(shù)
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 250g 用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)
NBB培養(yǎng)基250g用于啤酒中厭氧菌檢測
乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基 Lactobacillus broth Medium 用于乳酸桿菌增菌培養(yǎng)
EYA培養(yǎng)基基礎 Egg Yolk Agar Medium Base 250克 肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)
碎肉培養(yǎng)基250g/瓶用于痤瘡丙酸桿菌的培養(yǎng),不含維生素K,需添加(庖肉牛肉粒)incubationmedia碎肉培養(yǎng)基250g/瓶用于痤瘡丙酸桿菌的培養(yǎng),不含維生素K,需添加(庖肉牛肉粒)
THBMedium
dGTP 溶液,100mM0.5mL圖片含225mlGN增菌液均質袋用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)。
BacterialorganophosphorusMedium
苯*脫氨酶培養(yǎng)基 Phenylalanine Deaminase Medium 100 用于苯*脫氨酶試驗
改良Letheen肉湯基礎250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(ISO),每升培養(yǎng)基中需添加0204incubationmedia改良Letheen肉湯基礎250g/瓶用于化妝品衛(wèi)生微生物檢測(ISO),每升培養(yǎng)基中需添加0204
PALCAMAga
dGTP 溶液,100mM0.5mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合
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