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更新時間:2017-07-17 13:12:56瀏覽次數(shù):86次
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古細(xì)菌 + 真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次保存
dATP 溶液,100mM0.5mL圖片產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
dATP 溶液,100mM0.5mL圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
dATP 溶液,100mM0.5mL圖片DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C)%含量進(jìn)行推測,一般實(shí)驗中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
dATP 溶液,100mM0.5mL圖片詳細(xì)說明書:
dATP 溶液,100mM0.5mL圖片使用方法:
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15(S)-15-methyl Prostaglandin E2 (5 mg) 9-oxo-11。alpha。,15S-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(S)-15-methyl PGE2; 15(S)-15-methyl Prostaglandin E2
CID-755673 (1 mg) 2,3,4,5-tetrahydro-7-hydroxy-1H-benzofuro[2,3-c]azepin-1-one
*(1KG) Sodium Bienponete , Endotoxin and cell culture tested.
Luffariellolide (1 mg) 4-[(3E,7E)-4,8-dimethyl-10-(2,6,6-trimethyl-1-cyclohexen-1-yl)-3,7-decadien-1-yl]-5-hydroxy-2(5H)-furanone; Luffariellolide
SE 175 (100 mg) 2-[[4-[(nitnooxy)methyl]benzoyl]thio]-benzoic acid, methyl ester; SE 175
1-Tosyl-1H-benzo[d]imidazol-2-amine; Nodinitib-1 ML130
PtdIns-(4)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt) (1 mg) 1-(1,2-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-4-phosphate, diammonium salt; DPPI-4-P1; PtdIns-(4)-P1 (1,2-dipalmitoyl) (ammonium salt)
Peptide YY (3-36) (1 mg) Pancreatic Peptide YY|Peptide Tyrosine Tyrosine
Cardiogenol C (hydrochloride) (50 mg) 2-[[2-[(4-methoxyphenyl)amino]-4-pyrimidinyl]amino]-ethanol; Cardiogenol C (hydrochloride)
TBCA (10 mg) Casein Kinase II Inhibitor III|Tetrabromocinnamic Acid; (2E)-3-(2,3,4,5-tetrabromophenyl)-2-propenoic acid
Ruthenium Red (500 mg) emmonieted Ruthenium Oxychloride|C。I。 7780Ruthenium Red
DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 1 kDa DiaEasy Dialyzer (10 ml) MWCO 1 kDa
13(S)-HODE-biotin (1 mg) 13S-xy7noxy-9Z,11E-octadecadiene-(2-biotinyl)hydrazide; 13(S)-HODE-biotin
RHC-80267 (5 mg) U-57908; 1,1’-[O,O’-[1,6-hexanediylbis(iminocarbonyl)]dioxime]
鬼筆環(huán)肽-iFluor 488偶聯(lián)物 Phalloidin-iFluor 488 Conjugate
4-xy7noxyamphetamine (xy7nochloride) (5 mg) 4-
Oleic Acid (5 g) 9Z-Octadecenoic acid; Oleic Acid
9H-Inde,2-e][1,2,5]oxadiazolo[3,4-b]pyrazin-9-one SMER-3
AdditivesTyrosineAgarSR0580
沙保氏麥芽糖瓊脂 (CM0041a) Oxoid incubation media 沙保氏麥芽糖瓊脂 (CM0041a) Oxoid
塔賓曲霉 用于牛奶中*及其他抑制劑的檢測 支/瓶
醋酸鹽瓊脂250g用于細(xì)菌醋酸鹽試驗
中國藍(lán)瓊脂 250g 弱選擇性培養(yǎng)基,用于腸道致病菌的選擇性分離
PALCAM添加劑*5每支添加于200mlHB4188中
布氏肉湯 Brucella Broth 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標(biāo)準(zhǔn))
沙堡氏4%葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 SDA 250克 分離培養(yǎng)及鑒別真菌、酵母菌和
酸性L-J培養(yǎng)基250g/瓶含天冬酰胺,用于堿性物質(zhì)處理的分枝桿菌標(biāo)本,需添加甘油及雞蛋incubationmedia酸性L-J培養(yǎng)基250g/瓶含天冬酰胺,用于堿性物質(zhì)處理的分枝桿菌標(biāo)本,需添加甘油及雞蛋
改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯-*(mLST-Vm) 250g 用于阪崎桿菌選擇
dATP 溶液,100mM0.5mL圖片BAT培養(yǎng)基250g用于檢測果汁中耐熱嗜酸菌
BacteroidesPhageRecoveryMediumBroth
改良Y培養(yǎng)基 Agar Y,Modified 250 用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 (GB標(biāo)準(zhǔn))
RVR250g/瓶用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)incubationmediaRVR250g/瓶用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)
TSA
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