當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 鈣蛋白酶抑制劑1ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-10 12:24:09瀏覽次數(shù):297次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
鈣蛋白酶抑制劑1ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
鈣蛋白酶抑制劑1ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
鈣蛋白酶抑制劑1ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
IL4R Others Rat 大鼠 IL4R / Il4ra 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
K-562人慢性髓原白血病細(xì)胞 K-562 chronic myelogenous leukemia cells 1640+10% FBS
人神經(jīng)細(xì)胞HM
Caki-2(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腎小管上皮細(xì)胞HRPTEpiC
CM-H101新生兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
COLEC10 Others Mouse 小鼠 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人氣管上皮細(xì)胞HTEpiC
Beta-TC-6細(xì)胞,小鼠胰腺癌beta細(xì)胞 人癌細(xì)胞,SKBr-2HL細(xì)胞 小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-h
牛腎細(xì)胞;MDBK
LEPR Others Human 人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NTRK2 Others Mouse 小鼠 NTRK2 / TrkB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC
NCI-H209 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤
大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92 [NK92] 人胰島β細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)絲蛋白H(NF-H)免疫試劑盒 Human NF-H ELISA Kit
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
AndrogenReceptor(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
Humanmembranecofactorprotein,MCPELISA試劑盒人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人游離脂肪酸(FFA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat transforming growth factor beta 2 (TGF beta 2) ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒
Humangammaglutamyltranspeptidase,GGISAKit 人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanintactParathormone,i-PTHELISA試劑盒人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織甲基化組蛋白H3-K9染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
HumanLactoferrinantibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAKit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈣蛋白酶抑制劑1ml售后服務(wù)大鼠丙酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠丙酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠表皮生長因子受體2(Her2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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