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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測(cè)>> 無(wú)去垢劑細(xì)胞裂解液100ml售后服務(wù)
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更新時(shí)間:2017-07-10 12:20:51瀏覽次數(shù):160次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
無(wú)去垢劑細(xì)胞裂解液100ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
無(wú)去垢劑細(xì)胞裂解液100ml售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
FGF1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 aFGF / FGF1 蛋白
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
A3人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 The A3 of human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
人肺成纖維細(xì)胞HPF
B16-F1(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6
CPM Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase M / CPM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BxPC-3 人原位胰腺腺癌細(xì)胞
293XL-hTLR7人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR7 DMEM+10% Hyclone 滅活血清+10 μg/ml Blasticidin
NOG Protein Human 重組人 Noggin / NOG 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人前列腺平滑肌細(xì)胞(HPSMC)(5×105) 細(xì)胞名稱 種屬
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 (HPAF)( 5×105 )
人羊膜細(xì)胞;WISH
CL-0317AML-193(人急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人胃癌細(xì)胞;MGC-803 大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒 ,英文名: PGD2 ELISA Kit
人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanNeuralcelladhesionmoleculeligand1,NCAM-L1ELISAKit 96T/48T
魚熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒 Fish Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit
CLIAKitforPF-4/CXCL4(RabbitPlaetFactor4)ELISAKit兔子血小板因子4規(guī)格:48T/96T
食物糖精(saccharin)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitFSH人促卵泡素規(guī)格:48T/96T
人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat major histocompatibility complex class II (MHC II /AgB /H-1 II) ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA試劑盒
HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TSGFELISAKit 人特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanInsulinReceptorβ,ISR-βELISA試劑盒人胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanLegionellaantibodyIgA,LPAb-IgAELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgA(LPAb-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無(wú)去垢劑細(xì)胞裂解液100ml售后服務(wù)大鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*7α-羥化酶(CYP7A1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠*(CH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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