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更新時(shí)間:2017-07-10 12:20:12瀏覽次數(shù):180次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
RIPA裂解液(2X)100ml免費(fèi)代測(cè)FGF14 Protein Canine 重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白
大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CDH6 Others Mouse 小鼠 Cadherin-6 / CDH6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
NAMALWA人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 NAMALWA human Burkitt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞HBdSF
A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC
RIPA裂解液(2X)100ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
RIPA裂解液(2X)100ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
RIPA裂解液(2X)100ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
原代單核細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml
CREG1 Others Mouse 小鼠 CREG / CREG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501
GP2-293細(xì)胞,人胚腎上皮包裝細(xì)胞 大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC(HBZY-1),HBZY-1細(xì)胞 CL-0336FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2
BC-020(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HRCEpC-c 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞(HRCEpC) 500,000cells 人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA
TGFBR2 Others Rat 大鼠 TGFBR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人羊膜細(xì)胞;WISH
人腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 L1210(白血病細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人神經(jīng)細(xì)胞粘著分子(NRCAM)免疫試劑盒 Human neuronal cell adhesion molecule,NRCAM ELISA Kit
MouseHeatShockFactor1,HSF1ELISAKit小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組蛋白H3-K4甲基化西方雜交分析試劑盒5次
HumanMelanomaMarkerA,MART/Melan-AELISA試劑盒人黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanplacetallactogen,PLELISAKit人胎盤(pán)泌乳素(PL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human tumor specific antigen (TSA) ELISA Kit 人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒
HumanADisintegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humaninsulinautoantibodies,IAAELISA試劑盒人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)琥珀酰明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanLegionellaantibodyIgM,LPAb-IgMELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgM(LPAb-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
RIPA裂解液(2X)100ml免費(fèi)代測(cè)大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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