當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>蛋白提取/檢測>> 透析袋,截留分子量7KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 售后服務(wù)
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更新時(shí)間:2017-07-10 10:15:11瀏覽次數(shù):138次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
透析袋,截留分子量7KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
透析袋,截留分子量7KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
透析袋,截留分子量7KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA5 Protein Canine 重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
VERO E6細(xì)胞,猴腎細(xì)胞系 Lec1(卵巢細(xì)胞) 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]
人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒總RNAHDF-f tRNA
VCaP(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A
DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0057CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 骨肉瘤細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 CFPAC-1(胰腺癌細(xì)胞)
小鼠畸胎瘤細(xì)胞;P19
CADM3 Others Human 人 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HOMEC) ( 5×105 )
人胃癌細(xì)胞;MKN-45
CM-R064大鼠前列腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3 小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse
KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 ,英文名: ALP ELISA Kit
人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測試劑盒Humaneosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T
豬弓形蟲(TOX)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforNA(Humanneuraminidase)ELISAKit人神經(jīng)氨酸酶規(guī)格:48T/96T
體液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量檢測試劑盒20次
ELISAKitFlt3人FMS樣*激酶3規(guī)格:48T/96T
人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human aprotinin (AP) ELISA Kit 人*(AP)ELISA試劑盒
Humanfreefattyacids,FFAELISAKit 人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanhepaticlipase,HLELISA試劑盒人肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織*丙同酸轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性光譜法定量檢測試劑盒20次
HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISAKit人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透析袋,截留分子量7KD;直徑6mm;壓平寬度10mm 1卷,5M 售后服務(wù)大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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