考馬斯亮藍(lán)染色液100ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
考馬斯亮藍(lán)染色液100ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
考馬斯亮藍(lán)染色液100ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白

人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

ACVR1B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

EAC細(xì)胞，小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞 R 1610(中國倉鼠體細(xì)胞) 鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16

人絨癌細(xì)胞;JEG-3

RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞總RNAHHGMC tRNA

EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-

SW1990細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人胸膜瘤細(xì)胞,SMC-1細(xì)胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7

HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-22022 Endothelial Cell GrowthMedium MV2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基MV2(即用型) 500ml
TNFSF4 Others Cynomolgus 食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人腎癌Wilms細(xì)胞;G401

CL-0441SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HLF細(xì)胞，胚肺細(xì)胞 人前列腺上皮細(xì)胞,RWPE1細(xì)胞 人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2

獼猴肺細(xì)胞;MML2

TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠誘導(dǎo)型一氧化合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 ，英文名： iNOS ELISA Kit

人髓過氧化物酶(MPO)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmyeloperoxidase,MPOELISAKit 96T/48T

大鼠白介素20(IL-20)免疫試劑盒 Rat Interleukin 20,IL-20 ELISA KIT

CLIAKitforTF(HumanTransferfactor)ELISAKit人轉(zhuǎn)移因子規(guī)格：48T/96T

人體E-Cadherin基因甲基化檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitATMA/TMAB人抗甲狀腺微粒體抗體規(guī)格：48T/96T
兔C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat inhibin binding protein (INHBP) ELISA Kit 大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒

Humananti-epidemichemorrhagicfevervirusIgMantibody,EHFIgMELISAKit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM(EHF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISA試劑盒人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織短鏈烯脂酰輔酶A水合酶(ENOYLCOAHYDRATASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanmicroalbunminuria,MAU/ALBELISAKit人尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
考馬斯亮藍(lán)染色液100ml實(shí)驗(yàn)方法鵝心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA6ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

鵝細(xì)胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

鵝褪黑素受體1C(MTNR1C)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

鵝褪黑素受體1B(MTNR1B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝