轉(zhuǎn)膜液（Western），NC 500ml免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
轉(zhuǎn)膜液（Western），NC 500ml免費(fèi)代測(cè)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
轉(zhuǎn)膜液（Western），NC 500ml免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

AMY2A Others Human 人 AMY2A / Alpha-amylase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NFS-60細(xì)胞，小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴(lài)性 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1

人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB

PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells Transfected Lysate (positive control) (denatured)
CL-0386MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EJ人膀胱癌細(xì)胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(單核細(xì)胞白血病)
ITGA6 & ITGB1 Others Human 人 ITGA6 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人神經(jīng)束膜細(xì)胞總RNAHPC tRNA

SK-OV-3 人卵巢腺癌細(xì)胞

CL-0312293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞))5×106cells/瓶×2

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元

人支氣管上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B 人卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠*S轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1)ELISA試劑盒 ，英文名： GSTθ1 ELISA Kit

人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T

大鼠水通道蛋白1(AQP-1)免疫試劑盒 Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit

英文名稱(chēng)RatHCGELISAKit大鼠絨毛*(HCG)規(guī)格：96T/48T

活化*13(FACTORXIIIa)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitANP人心鈉肽規(guī)格：48T/96T
兔白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat inhibin A (INH-A) ELISA Kit 大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒

Humananti-Epstein-Barrvirusantibody,EBVELISAKit 人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISA試劑盒人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織丁酰*酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanmitogenactivitedproteinkinase,MAPKELISAKit人原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)膜液（Western），NC 500ml免費(fèi)代測(cè)白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

白介素1(IL-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

猴壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝