Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.4)500ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.4)500ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.4)500ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

M1細(xì)胞，小鼠白血病細(xì)胞 脆弱擬桿菌 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTF

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12

P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml

EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

FRhK-4恒河猴胚腎細(xì)胞 FRhK-4 Ganges RIver monkey embryo kidney cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MCF 7B(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼倉鼠腎細(xì)胞)
20. 細(xì)胞系統(tǒng)

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251

CM-H128人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠子細(xì)胞;U14 小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Rattus

F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA試劑盒 ，英文名： DLG4 ELISA Kit

人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanTriggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,TREM-1ELISAKit 96T/48T

大鼠高密度脂蛋白2(HDL2)免疫試劑盒 Rat high density lipoprotein 2,HDL2 ELISA Kit

CLIAKitforVEGF-BELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B規(guī)格：48T/96T

免疫印跡AP-BCIP/NBT底物顯色試劑盒10次

ELISAKitSCCAg-2人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2規(guī)格：48T/96T
兔交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human insulin (INS) ELISA Kit 人胰島素(INS)ELISA試劑盒

Humanbacterialvaginosis,BVELISAKit 人細(xì)菌(BV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.4)500ml實(shí)驗(yàn)方法雞α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

雞N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

雞L苯丙酸解酶(PAL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

雞FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝