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更新時(shí)間:2017-07-10 09:38:55瀏覽次數(shù):112次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
ELISA終止液100ml售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
ELISA終止液100ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司ELISA終止液100ml售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白
人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
GBP2 Others Human 人 GBP-2 / GBP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
7WD10細(xì)胞,人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株 短小芽孢桿菌 犬胸腺細(xì)胞;cf2Th
615小鼠肺癌瘤株;HP615
NRK(大鼠腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MGC-803 人胃癌細(xì)胞
NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA 人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
IL12A & IL12B Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞裂解物HOPCL
人肺癌細(xì)胞;A-427 [A427]
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse
CR2 Others Human 人 CD21 / CR2 / C3DR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鎖鏈素(DES)免疫試劑盒 Human desmosine,DES ELISA Kit
考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Rattransforminggrowthfactorα,TGF-αELISA試劑盒大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLipoarabinomannan,LAMELISA試劑盒人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanOrexinreceptor,OXRELISAKit人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human trypsin (trypsin) ELISA Kit 人*(trypsin)ELISA試劑盒
HumanLymeIgGELISAKit 人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanglutamicaciddecarboxylase,GADELISA試劑盒人*脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織單胺氧化酶A型(MAO-A)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20次
HumanMousemyeloperoxidase-antineutrophilcytoplasmicantibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAKit人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISA終止液100ml售后服務(wù)雞防御素ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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雞促性腺素釋放素受體(GnRHR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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