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更新時間:2017-07-10 09:37:41瀏覽次數(shù):183次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)ELISA包被緩沖液(1×)100ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
ELISA包被緩沖液(1×)100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
ELISA包被緩沖液(1×)100ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL11 Protein Human 重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
NXPH1 Others Mouse 小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CCC-HSF-1細(xì)胞,人皮膚成纖維細(xì)胞 粘質(zhì)沙雷伯氏菌 中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL
C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA
NCI-N87(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 VSIG8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株
EGFR Others Human 人 EGFR / HER1 / ErbB1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES
FaDu細(xì)胞,人咽鱗癌細(xì)胞 人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞,FD4細(xì)胞 CL-0379MCF 7B(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA
IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
PCNA Others Human 人 PCNA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO
HEL299細(xì)胞,紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 巨核細(xì)胞,Dami細(xì)胞 人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080
KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422
CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎兒血紅蛋白(HBF)免疫試劑盒 Human fetal hemoglobin,HBF ELISA Kit
雙縮脲法蛋白含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatTotalbileacide,TBAELISA試劑盒大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLinkerforactivationofTcell,LAISA試劑盒人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanOrexinAELISAKit人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human folic acid (FA) ELISA Kit 人*(FA)ELISA試劑盒
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanGlucosetransporter3,GLUT3ELISA試劑盒人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20/50次
Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISAKit人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
ELISA包被緩沖液(1×)100ml售后服務(wù)雞免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞卵黃高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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