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更新時(shí)間:2017-07-10 09:37:11瀏覽次數(shù):148次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
通用顯影液500ml免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
通用顯影液500ml免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
我司通用顯影液500ml免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白
人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
WISH細(xì)胞,人羊膜細(xì)胞 普通變形桿菌 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2
NCI-H292(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
T-108A膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
EGFR Others Mouse 小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
小鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
F9小鼠畸胎瘤細(xì)胞 F9 mouse teratoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Interleukin-10 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞)
IL5 Others Mouse 小鼠 IL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人上皮細(xì)胞;MCF-10A
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7
Dami細(xì)胞,巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 黑色素瘤,MM96L細(xì)胞 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1
615小鼠前胃癌瘤株;Fc
CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胎盤催乳素(HPL)免疫試劑盒 Human placenta lactogen,HPL ELISA Kit
植物脫氫酶(SDHA)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatToll-likereceptor9,TLR-9ELISA試劑盒大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanleukotrieneE4,LT-E4ELISA試劑盒人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔堿性磷酸酶(ALP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human oxidized low density lipoprotein (OxLDL) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒
Humananti-parainfluenzavirusIgGantibody,anti-PIVIgGELISAKit 人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanglucoseoxidase,GODELISA試劑盒人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanMullerianInhibitingSubstance/Anti-Mullerianhormone,MIS/AMHELISAKit人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
通用顯影液500ml免費(fèi)代測雞*(LZM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞熱休克蛋白72(Hsp72)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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