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更新時(shí)間:2017-07-10 09:31:34瀏覽次數(shù):121次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
PPBP Protein Human 重組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
Malmc細(xì)胞,人皮膚纖維微細(xì)胞系 光滑念珠菌 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3
倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;HL-1
MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1
貓腎細(xì)胞;F81 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞,CGM1細(xì)胞 CCC-SMC-2細(xì)胞,兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]
CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人脂肪細(xì)胞-皮下(HPA-s)(1×106 )
人癌細(xì)胞;MDA-MB-468
CM-R080大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 Mouse
FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 ,英文名: PGE1 ELISA Kit
人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpeptidemajorhistocompatibilitycomplex,pMHCELISAKit 96T/48T
魚*(腎淀粉樣變)(LZM)免疫試劑盒 Fish lysozyme(renal amyloidosis)(LZM)ELISA kit
CLIAKitforPFKP(Humanphosphofructokinase-plaet)ELISAKit人血小板型磷酸果糖激酶規(guī)格:48T/96T
食物三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitACTH人促腎上腺皮質(zhì)激素規(guī)格:48T/96T
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat insulin like growth factor binding protein 1 (IGFBP-1) ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒
HumanLebtospiraIgMELISAKit 人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanGelsolin,GSELISA試劑盒人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織丙同酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanMyosinlightChain,MLCELISAKit人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T使用說(shuō)明書牛膽酸(Cholicacid)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛布魯氏桿菌抗體ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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