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更新時(shí)間:2017-07-10 09:15:02瀏覽次數(shù):125次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
我司葉綠體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
葉綠體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
葉綠體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人臍血間質(zhì)干細(xì)胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells
METRN Others Mouse 小鼠 Meteorin / METRN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
MG-63細(xì)胞,人成骨肉瘤細(xì)胞 單增李斯特氏菌 表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB
人干細(xì)胞因子單克隆抗體細(xì)胞株;AMS2(SCF3)
Hs 746T(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293
滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM-prf
EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CV-1細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 HPAC(人胰腺癌細(xì)胞) CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
EGFL6 Protein Human 重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MDA-MB-468(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人前列腺成纖維細(xì)胞裂解物HPrFL
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 *(含100mL酶解緩沖液) 10mL
THP-1人單核白血病細(xì)胞 Human
CNTNAP2 Others Mouse 小鼠 CNTNAP2 / PR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖原合成酶免疫試劑盒 Human glycogen synthetase ELISA Kit
血鈉濃度測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatTestoterone,ISA試劑盒大鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLDL-ICELISA試劑盒人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanNeurotensin,NISAKit人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat thrombopoietin (TPO) ELISA Kit 大鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒
HumanComplement7,C7ELISAKit 人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanfibromodulin,FMODELISA試劑盒人纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OISAKit人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葉綠體蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T售后服務(wù)人Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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