當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞培養(yǎng)>> 明膠水溶液(1%,無菌)100ml使用說明書
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更新時間:2017-07-10 09:08:33瀏覽次數(shù):347次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)明膠水溶液(1%,無菌)100ml使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
明膠水溶液(1%,無菌)100ml使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
SF767(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells
IL25 Others Rat 大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SK-N-SH細(xì)胞,人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg
人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z
HCT-15(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人支氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MuM-2C細(xì)胞, 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 赭綠青霉 小鼠成纖維細(xì)胞;φ2
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LLC(小鼠肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
7. 肺部細(xì)胞系統(tǒng)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C
CL-0349Hela 299(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;C918 大鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
F9 小鼠畸胎瘤細(xì)胞
SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒 ,英文名: MTL ELISA Kit
人天*轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)ELISA檢測試劑盒HumanAspartateaminotransferase,GOT/GPISAKit 96T/48T
大鼠11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)免疫試劑盒 Rat 11 beta hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1 ELISA kit
CLIAKitforRenin(MouseRenin)ELISAKit小鼠腎素規(guī)格:48T/96T
石蠟切片神經(jīng)元胞漿尼斯(NISSL)染色試劑盒50次
PPAR-γ人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格:48T/96T
兔子白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human von Willebrand factor / ristocetin cofactor (VWF) ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒
HumanBlockingantibody,BAELISAKit 人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humaneyemuscleantibody,EMAbELISA試劑盒人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織TIE2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanoncostatinMreceptor,OSMRELISAKit人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
明膠水溶液(1%,無菌)100ml使用說明書人P53(P53)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人P16蛋白(P16)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人OJ抗體/抗異亮酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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