D-Hanks' *，不含酚紅500ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
D-Hanks' *，不含酚紅500ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
D-Hanks' *，不含酚紅500ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS

CD300LG Others Human 人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

TG-905細(xì)胞，人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 熒光假單胞菌 人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞總RNAHVT tRNA

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS

H4(人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1
前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基PADM

EVI2A Others Human 人 EVI2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA

大鼠腎小球系膜細(xì)胞;HBZY-1 結(jié)腸腺癌細(xì)胞，LS 174T細(xì)胞 RPC細(xì)胞，大鼠垂體細(xì)胞

CNE1, 人鼻咽癌細(xì)胞系 Human

CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CD24 Others Mouse 小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HUAECL

人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

COS-1細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 T-24(膀胱變移細(xì)胞癌) 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF

EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)

BC-020(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠子細(xì)胞;U14
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)ELISA試劑盒 ，英文名： PPARγ ELISA Kit

人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA檢測試劑盒Humangeneraltranscriptioncomplex,GTCELISAKit 96T/48T

大鼠糖原合成酶激酶(GSK)免疫試劑盒 Rat glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit

英文名稱RatAquaporin4ELISAKit大鼠水通道蛋白4(AQP4)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

化妝品環(huán)氨酸(cyclamate)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitATⅡR1人血管緊張素Ⅱ受體1抗體規(guī)格：48T/96T
兔子表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒

HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit 人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanEstradiol,E2ELISA試劑盒人雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織SPHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit人孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
D-Hanks' *，不含酚紅500ml實(shí)驗(yàn)方法人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝