當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞培養(yǎng)>> *-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說明書
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更新時間:2017-07-07 13:09:41瀏覽次數(shù):269次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
RBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
U-2 OS人骨肉瘤細胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS McCoy's 5A+10%FBS
TNFRSF18 Others Rat 大鼠 GITR / TNFRSF18 人細胞裂解液 (陽性對照)
Ealy926細胞,人腸系膜下腔動脈血管內(nèi)皮細胞 白色假絲酵母/白色念球菌 人肺動脈內(nèi)皮細胞總RNAHPAEC tRNA
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich
F81(貓腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0281HELF(人胚肺成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照)
22RV1 人前列腺癌細胞
MDCK-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)狗腎上皮細胞 MDCK-EGFP-puro (lentiviral construct stable strains of canine renal epithelial cells) EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (His 標簽)
人肺泡上皮細胞 (HPAEpiC)( 1×106 ) rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 Rattus
TH Others Human 人 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人臍帶間充質(zhì)干細胞cDNAHUMSC cDNA
大鼠雪旺細胞;RSC96
LTEP-a-2細胞,肺腺癌細胞 人喉表皮樣癌細胞,HEp-2細胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Short Isoform ) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人銅鋅-過氧化物岐化酶(SOD1)免疫試劑盒 Human Superoxide dismutase [Cu-Zn] (SOD1) ELISA kit
纖維素酶(CL)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
Ratsolubleplaetendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA試劑盒大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanisocitratedehydrogenase,ICDELISA試劑盒人異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humannasopharyngealcarcinoma,NPCELISAKit人鼻咽癌(NPC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human vascular endothelial cadherin complex (VE-cad) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA試劑盒
Humananti-neutrophilantibody,ANAELISAKit 人抗中性粒細胞抗體(ANA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanerythrocytemembraneprotein,EMPELISA試劑盒人紅細胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織RSE激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanOsteoprotegerin,OPGELISAKit人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%)100ml使用說明書人β(β-OHB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β酚(β-naphthol)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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