當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞培養(yǎng)>> *-EDTA溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)100ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-07 13:09:25瀏覽次數(shù):187次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.5-10)500ml使用說明書
硼酸鹽緩沖液(BBS,pH8.4)500ml售后服務(wù)
DEAE-Dextran細胞轉(zhuǎn)染試劑盒200T使用說明書
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)100ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)100ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*-EDTA溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)100ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
RAG(小鼠腎腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人細胞裂解液 (陽性對照)
ECV-304細胞,人臍靜脈內(nèi)皮(具有T24細胞特性) * 人牙齦成纖維細胞總RNAHGF tRNA
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WB-F344(大鼠肝上皮樣干細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0271D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3
人膀胱癌細胞;5637(HTB-9)
F3 Others Rat 大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照)
骨髓間質(zhì)干細胞 Adult bone marrow mesenchymal stem cells
A172細胞,人膠質(zhì)母細胞瘤細胞 桔青霉 人表皮黑色素細胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg
RWPE-2(人前列腺正常細胞) 5×106cells/瓶×2
HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1
人氣管上皮細胞(HTEpiC)(5×105 )
人葡萄膜黑色素細胞;UM
CL-0295MV3(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;MuM-2B 大鼠皮下脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL
LM-8 小鼠骨肉瘤
WFDC2 Others Human 人 WFDC2 / HE4 / WAP5 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒 ,英文名: VD3 ELISA Kit
人透明質(zhì)酸(HA)ELISA檢測試劑盒HumanHyaluronicacid,HAELISAKit 96T/48T
大鼠 Klotho 免疫試劑盒 Rat Klotho ELISA Kit
CLIAKitforRBP-4ELISAKit大鼠*結(jié)合蛋白4規(guī)格:48T/96T
石蠟切片糖原高碘酸希爾(PAS)法染色試劑盒50次
ELISAKitCasp-9人胱天蛋白酶9規(guī)格:48T/96T
兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human angiotensinase (Angiotensinase) ELISA Kit 人血管緊張肽酶(Angiotensinase)ELISA試劑盒
Humananti-gastricparietalcellantibody,AGPA/PCAELISAKit 人抗胃壁細胞抗體(AGPA/PCA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanepstein-barrvirusIgM,EBvIgMELISA試劑盒人EB病毒IgM(EBvIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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