羥自由基檢測試劑盒200T實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
羥自由基檢測試劑盒200T實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NCI-H2170(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2

氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

FSTL5 Others Human 人 FSTL5 人細胞裂解液 (陽性對照)

TALL-104細胞，急性T淋巴細胞白血病細胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤瘤株,G422細胞 人淋巴成纖維細胞裂解物HLFL

家兔皮膚細胞;DR-S1

Calu-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0054Calu-3(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;PA317
人胚肺成纖維細胞;IMR-90

FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H358 人非小細胞肺癌細胞

LX-2, 人肝星形細胞株

人臍靜脈平滑肌細胞

人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C 人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚腎細胞;2V6.11

HCT-15 人結(jié)直腸腺癌細胞

SK-NEP-1人腎母細胞瘤細胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標簽)

大鼠腦膜細胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 Mouse
大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人唾液酸(SA)免疫試劑盒 Human Sialic acid,SA ELISA Kit

植物蔗糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣

RatSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

humanInterleukin27,IL-27ELISA試劑盒人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanmyelinbasicproteinautoantibody，MBPELISAKit人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/anti-RA33-antibody,hnRNP/RA33ELISAKit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanendomorphin-2,EM-2ELISA試劑盒人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織PKCα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanPentosidineELISAKit人戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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