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更新時間:2017-07-07 12:48:56瀏覽次數(shù):140次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)羥自由基檢測試劑盒500T售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
羥自由基檢測試劑盒500T售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
羥自由基檢測試劑盒500T售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H838(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
RAMP3 Others Human 人 RAMP3 人細胞裂解液 (陽性對照)
TF-1細胞,人血液白血病細胞 615小鼠狀肺腺癌瘤株,P615細胞 人少突膠質(zhì)前體細胞裂解物HOPCL
豬胚胎傳代細胞;ST
Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0030Bcap-37(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6
小梁網(wǎng)細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FCGR1 Others Rat 大鼠 CD64 / FCGR1A 人細胞裂解液 (陽性對照)
NIH?3T3? 小鼠成纖維細胞
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1
Hela, 人細胞系
人小細胞肺癌細胞;NCI-H209 大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚腎細胞;293 Cells, low passage
人支持細胞*培養(yǎng)基 100mL
EL4細胞,小鼠淋巴瘤細胞 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細胞) 人肺轉(zhuǎn)化細胞;AE1201
CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)
SCaBER(人膀胱鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人外顯肽(extein)免疫試劑盒 Human extein ELISA Kit
動植物組織葡萄糖含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISA試劑盒大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin2,IL-2ELISA試劑盒人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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組織PIM1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
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羥自由基檢測試劑盒500T售后服務人補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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人補體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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