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更新時間:2017-07-07 12:46:57瀏覽次數(shù):160次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)我司α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測試劑盒100T售后服務本著標準*、質(zhì)量*、服務*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務,咨詢!
α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測試劑盒100T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測試劑盒100T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NCI-H520(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HGF Others Mouse 小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照)
AL7P/HL-60R細胞,人原髓細胞白血病細胞 615小鼠T細胞性白血病瘤株,L7712細胞 孔雀綠磷酸鹽檢測試劑盒MGmP
白牦牛皮膚細胞;Yak-2
C4-2(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]
卵巢成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FCGR2A Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
MIN6 小鼠胰島素瘤細胞
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2 大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚腎細胞;293 [HEK-293]
人腎動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
RH-35細胞,大鼠肝癌細胞 HeLa(細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1036
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)
SK-MES-1(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)免疫試劑盒 Human RAGE ELISA Kit
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatRetinol-bindingprotein,RBPELISA試劑盒大鼠*結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin1β,IL-1βELISA試劑盒人白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
humanMusmusculussimilarto60SribosomalproteinL12,LOC382344ELISAKit人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cardiotrophin 1 (CT-1) ELISA Kit 人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒
Humanneuronalnuclearautoantibody,ANNA-1/HuELISAKit 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanElastaseELISA試劑盒人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PDGFRβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanpeptidoglycan,PGELISAKit人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測試劑盒100T售后服務人超抗原(Sag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腸病毒(Enterovirus)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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